本发明公开了一种展示促内吞性靶向膜肽的载药小细胞的载药小细胞及其制备方法和应用，所述载药小细胞表面表达了肿瘤细胞靶向膜肽，所述肿瘤细胞靶向膜肽的氨基酸序列如SEQ ID No:2所示。发明通过化转方法将pBV220‑arac‑LOP重组质粒转入到大肠杆菌Nissle 1917ΔminCD::minE工程菌中，并进行蛋白表达以制备表面展示促内吞性靶向膜肽的Minicells载体，再进行药物孵育，制得药物小细胞。本发明提供的展示促内吞肽的载药小细胞，可通过简单的生物发酵方式进行大规模生产，成本低，并能有效被肿瘤细胞摄取，增强药物的抗肿瘤作用。
本发明属于分子生物学技术领域，公开了一株过表达mcmA基因的大肠杆菌Nissle 1917工程菌及其构建方法与应用，通过电击转化法将过表达mcmA基因的重组质粒随机转入大肠杆菌Nissle 1917菌株中进行表达，所述mcmA基因的核酸序列如SEQ ID No:1所示。本发明基于对EcN拮抗食源性致病菌机制的研究，证明mcmA基因在EcN拮抗食源性致病菌中起主要作用，成功构建的过表达工程菌株可在制备抗肠道病原体药物、抗炎药物中应用。
本发明公开了一种重组人源融合胶原蛋白及其高效羟基化方法与应用。该重组人源融合胶原蛋白的基酸序列如SEQ ID No.1所示，其细胞活性比单一蛋白的高。通过将来源于炭疽芽孢杆菌的脯氨酸羟化与人源胶原基因构建双质粒共表达，先诱导表达来源于炭疽芽孢杆菌的脯氨酸羟化酶，待胞内羟化酶积一定量后，再诱导强启动子控制下的胶原蛋白快速表达，通过调控酶和胶原蛋白的表达时间点，实现大子量融合胶原的表达及同步高效羟基化，羟化率达到63％，羟化率更高的胶原蛋白其稳定性更好且生物性更高。
