一种高比活L‑谷氨酸氧化酶基因多位点突变体及其制备方法和应用,其编码蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID No.52所示。采用分子体外重组技术筛选高活性L‑谷氨酸氧化酶基因,通过载体构建、酶活性筛选以及多位点突变技术等制备得到所述高比活L‑谷氨酸氧化酶基因多位点突变体,该多位点突变体在同一基因上含有9个不同突变位点,使该多位点突变体对L‑谷氨酸的氧化专一性和比活性均大幅度提高,可应用于检测食物中L‑谷氨酸的含量。
本发明公开了一个猪6号染色体上用于溯源的SNP分子标记及其应用,所述的SNP分子标记通过NCBI数据库序列比对获得,其由Ecol30I限制性内切酶识别,共578bp,第232位碱基处有一个碱基替换,为232C或232T,其序列如SEQ ID NO.1所示。通过在包括10个猪品种或品系的试验群体中分析SNP分子标记在试验群体中等位基因的分布情况,发现本发明的SNP分子标记在不同的品种或品系中的等位基因频率接近,多态性丰富,品种或品系间等位基因频率分布差异小,并且杂合度都大于0.3,该SNP标记可用作猪肉产品DNA溯源。
本发明公开了一个猪6号染色体上用于溯源的SNP分子标记及其应用,所述的SNP分子标记是通过NCBI数据库序列比对获得的,该SNP分子标记由HinfI限制性内切酶识别,共570bp,第403位碱基处有一个碱基替换,为403T或403G,其序列如SEQ ID NO.1所示。通过在包括10个猪品种或品系的试验群体中分析SNP分子标记在试验群体中等位基因的分布情况,发现本发明的SNP分子标记在不同的品种或品系中的等位基因频率接近,多态性丰富,品种或品系间等位基因频率分布差异小,并且杂合度都大于0.3,该SNP标记可用作猪肉产品DNA溯源。
一种来自灰黄链霉菌的L-谷氨酸氧化酶基因及其制备方法和应用,所述L-谷氨酸氧化酶基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,全长2004bp,其编码蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明从土壤中筛选出一株产L-谷氨酸氧化酶的灰黄链霉菌,从该菌株中获得所述L-谷氨酸氧化酶基因的全长序列,得到核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的L-谷氨酸氧化酶基因,并利用基因合成方法合成出该L-谷氨酸氧化酶基因,大大降低了L-谷氨酸氧化酶从野生菌中提取的成本,提高了该L-谷氨酸氧化酶的催化活性,同时所述L-谷氨酸氧化酶底物专一性很强,能特异性地催化L-谷氨酸,可应用于L-谷氨酸含量检测,用于食品工业和临床生化检测领域。