本申请公开了一种融合基因、融合蛋白及制备方法和牛支原体亚单位疫苗。融合蛋白由第一序列或第二序列表达而成。第一序列的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，第二序列的核苷酸序列与如SEQ ID NO：1所示的第一序列至少具有95％的相似度。疫苗包括融合蛋白和佐剂。本申请的融合蛋白的抗原性、免疫原性、表达水平比天然蛋白质更高，免疫原性更强，对动物安全性高，也能够使用生物反应器大规模无血清悬浮培养制备，故能够实现大规模批量生产，批次间稳定，质控容易，也能大大降低疫苗的生产成本。
本发明提供了一种免疫组合物及亚单位疫苗，所述免疫组合物包括一种蛋白，所述蛋白选自以下的一种或者两种以上的任意组合：采用SEQ ID NO:1或3或5或7或9的核酸分子或者与SEQ ID NO:1或3或5或7或9的核苷酸序列95％以上相同的核酸分子编码的鸡毒支原体相关蛋白。该疫苗使用真核表达，产品的抗原性、免疫原性与天然蛋白质相似，表达水平较高，免疫原性强，保护效果好，对鸡没有致病性，并且本发明的疫苗可以通过生物反应器大规模无血清悬浮培养制备，同时大大降低了疫苗生产成本。
本发明公开了一种猪伪狂犬病病毒亚单位疫苗的制备方法及其应用，其包含：采用SEQID NO:1或SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:9的核酸分子或者与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:9的核苷酸序列95％以上相同的核酸分子编码的猪伪狂犬病毒相关蛋白。该疫苗使用真核表达，产品的抗原性、免疫原性与天然蛋白质相似，表达水平较高，免疫原性强，保护效果好，对动物没有致病性，并且本发明的疫苗可以通过生物反应器大规模无血清悬浮培养制备，同时大大降低了疫苗生产成本。
本发明公开了一种免疫组合物，其包含采用序列如SEQ ID NO:1所示的核酸分子或者与SEQ ID NO:1的核苷酸序列95％以上相同的核酸分子编码的鹅星状病毒外衣壳结构蛋白。所述免疫组合物可应用为鹅星状病毒病毒样颗粒新型基因工程亚单位疫苗，其抗原表达水平较高，能够自发组装成病毒样颗粒(Virus like particles,VLPs)，免疫原性强，对鹅没有致病性，并且本发明的鹅星状病毒病毒样颗粒新型基因工程亚单位疫苗可以使用生物反应器大规模无血清悬浮培养制备，也大大降低了疫苗生产成本。
本发明公开了一种重组猫疱疹病毒1型gB‑gD蛋白及其应用。所述重组猫疱疹病毒1型gB‑gD蛋白包括：具有SEQ ID NO：2所示序列的第一蛋白；和/或，具有SEQ ID NO：6所示序列的第二蛋白。所述疫苗包含所述重组猫疱疹病毒1型gB‑gD蛋白以及医药学上可接受的载剂。本发明提供的重组猫疱疹病毒1型gB‑gD蛋白的半衰期长，分子稳定性高，能形成二聚体特别是异二聚体，免疫原性强，同时其能通过哺乳动物细胞表达系统以生物反应器大规模无血清悬浮培养方式制备，不仅表达水平高，蛋白免疫原性好，而且由此制备的疫苗还具有质控容易、批次间稳定、生产成本低等优点。
本申请公开了一种永生化猪骨髓巨噬细胞、其构建方法及应用。所述构建方法包括：以包含SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的第一重组质粒转染猪骨髓巨噬细胞，再培养转染后的细胞，并分离出细胞单克隆。进而，本申请还通过以包含SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3所示核苷酸序列的第二重组质粒、第三重组质粒转染永生化猪骨髓巨噬细胞的方式对其进行了改造。本申请提供的永生化猪骨髓巨噬细胞系的构建及改造方法均简单易操作，所获永生化猪骨髓巨噬细胞系具有可以持续传代的显著特点，其经改造后对病毒的敏感性高。
本发明公开了一种猫冠状病毒重组抗原、其基因工程亚单位疫苗及应用。所述猫冠状病毒重组抗原包括具有SEQ ID NO：2所示序列或其增加或截短的序列的重组蛋白。所述疫苗包含所述重组蛋白以及医药学上可接受的载剂。本发明提供的猫冠状病毒重组抗原免疫原性高，能产生高浓度的中和抗体，不会产生ADE效应。同时，本发明通过采用杆状病毒昆虫细胞表达系统，并使用悬浮培养Sf9细胞的方式进行所述猫冠状病毒重组抗原的表达，不仅表达水平高，蛋白免疫原性好，而且由此制备的疫苗还具有质控容易、批次间稳定、生产成本低等优点。
本发明公开了一种重组FCV抗原及猫嵌杯病毒基因工程亚单位疫苗。所述重组FCV抗原包括分别具有SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3所示序列的两种蛋白。所述疫苗包含所述重组FCV抗原以及医药学上可接受的载剂。本发明提供的重组FCV抗原易于自组装形成结构稳定、免疫原性优良的病毒样颗粒(VLP)，该VLP的形态、稳定性、免疫原性接近野生病毒粒子，同时其能通过昆虫细胞表达系统以生物反应器大规模无血清悬浮培养制备，表达水平高，蛋白免疫原性好，由此制备的疫苗质控容易、批次间稳定、生产成本低。
