本发明公开了一种产气荚膜梭菌基因工程亚单位疫苗、其制备方法及应用。所述疫苗包蛋白组合物以及医药学上可接受的载剂,所述蛋白组合物包含分别具有SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:10所示序列的三种融合蛋白。本发明提供的所述疫苗无任何毒性,安全性高,免疫原性好,能够在动物体内产生较强的体液免疫,免疫后的动物能够抵御强毒攻毒,并且还可以使用生物反应器大规模无血清悬浮培养制备,具有质控容易、批次间稳定、生产成本低等优点。
本发明公开了一种禽脑脊髓炎病毒新型基因工程疫苗,其包含编码基因序列如SEQ ID NO:1所示的融合蛋白。该疫苗的抗原性、免疫原性和功能与天然蛋白质相似,表达水平较高,免疫原性强,能够在禽类体内产生较强的体液免疫,对禽类没有致病性,免疫后的禽类能够抵御强毒攻毒,并且该疫苗可以通过生物反应器大规模无血清悬浮培养制备,大大降低了疫苗生产成本。
本发明涉及一种牛疱疹病毒抗原组合物及其应用,包括以下蛋白中的至少两种:氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的牛疱疹病毒重组gB蛋白、氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的牛疱疹病毒重组gD蛋白、氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示的牛疱疹病毒重组gH蛋白和氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示的牛疱疹病毒重组gL蛋白。本发明综合分析了牛疱疹病毒的gB蛋白、gD蛋白、gH蛋白和gL蛋白的序列信息和空间结构,并对四种蛋白分别进行了定点突变,提高了蛋白各自的免疫原性,能够更好地激发中和抗体,免疫效果更好,免疫期限更长。
本发明公开了一种鸡传染性贫血病毒基因工程疫苗,其包含编码基因序列如SEQ ID NO:1所示的融合蛋白。该疫苗的抗原性、免疫原性和功能与天然蛋白质相似,表达水平较高,免疫原性强,对鸡等禽类没有致病性,能够在禽类体内产生较强的体液免疫,免疫后的禽类能够抵御强毒攻毒,并且该疫苗可以通过生物反应器大规模无血清悬浮培养制备,大大降低了疫苗生产成本。
本发明公开了一种小反刍兽疫病毒基因工程亚单位疫苗,其包含编码基因序列如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:3所示的融合蛋白。本发明通过将小反刍兽疫病毒(PPRV)的H、F蛋白改造后连接,获得融合蛋白(PPRV‑Fu),并以该PPRV‑Fu蛋白制备小反刍兽疫病毒基因工程亚单位疫苗,所获疫苗的抗原性、免疫原性和功能与天然蛋白质相似,表达水平较高,免疫原性强,只需要很少量就能提供很好的免疫效果,对免疫后的动物没有致病性,同时本发明利用CHO细胞等表达该PPRV‑Fu蛋白,不仅表达量高,而且还可以通过生物反应器大规模无血清悬浮培养制备,大大降低了疫苗生产成本。
本发明公开了一类用于抑制非洲猪瘟病毒复制的shRNA,其包含的两种shRNA的序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示。本发明还提供了前述的一类shRNA在抑制非洲猪瘟病毒复制中的用途。本发明还提供了包含前述shRNA的重组表达载体、腺相关病毒及其制备方法。本发明提供的一类shRNA及重组AAV病毒可以用于制备预防和/或治疗非洲猪瘟病毒感染的药物,例如治疗性疫苗,并能有效抑制非洲猪瘟病毒的复制和感染,且其制备工艺简单,利于规模化生产和推广应用。
本发明公开了一种牛病毒性腹泻病毒重组亚单位疫苗,其包含作为有效成分的重组牛病毒性腹泻病毒融合蛋白(BVDV‑Fu),所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明的疫苗能够在牛体内产生较强体液免疫,免疫后的牛能够抵御强毒攻毒,并且本发明的疫苗能够大规模工业化制备,成本低廉,质量稳定,安全性高。
本发明提供了一种非洲猪瘟预防和/或治疗性中和抗体,其为嵌合单克隆抗体,包含重链和轻链,其中的轻链可变区具有SEQ ID No:6所示序列,重链可变区具有SEQ ID No:2所示序列,轻链恒定区、重链恒定区均来源于猪源抗体。本发明还提供了编码嵌合单克隆抗体的基因、包含所述编码基因的表达载体或转化体等。所述表达载体可以是将所述编码基因插入pAAV‑CAG载体而得。本发明还提供了一种利用所述表达载体制备AAV的方法。本发明提供的所述抗体序列或转化体等可以用于制备非洲猪瘟病毒的检测试剂、用于在受试动物中诱导针对非洲猪瘟病毒抗原的免疫反应的药剂或者用于预防动物受非洲猪瘟病毒感染的药剂,提供迅速而持续长久的抗体保护,例如非洲猪瘟病毒疫苗。
本发明提供了一种鸭坦布苏病毒基因工程亚单位疫苗及其制备方法和应用。本发明采用序列如SEQ ID NO:1所示的核酸分子或者与SEQ ID NO:1的核苷酸序列95%以上相同的核酸分子编码鸭坦布苏病毒E2蛋白,包含所述鸭坦布苏病毒E2蛋白的免疫组合物可用于制备鸭坦布苏病毒基因工程亚单位疫苗,该疫苗的抗原性、免疫原性和功能与天然蛋白质相似,表达水平较高,免疫原性强,对鸭没有致病性,并且本发明的疫苗可以通过生物反应器大规模无血清悬浮培养制备,大大降低了疫苗生产成本。