本发明公开了一锅法生产莱鲍迪苷D的方法，包括如下步骤：构建能分泌表达糖基转移酶UGT1的重组菌1，所述糖基转移酶UGT1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；在pH3.5‑7.8的培养基中培养重组菌1,得到培养液；在培养液中加入底物莱鲍迪苷A，加入尿苷二磷酸葡萄糖，硫酸镁或氯化镁，甲醇，反应，得到莱鲍迪苷D。本发明的一锅法生产莱鲍迪苷D在重组菌1发酵生成糖基转移酶UGT1的同时可催化莱鲍迪苷A生成莱鲍迪苷D，无需纯化UGT1和离心分离就能获得莱鲍迪苷D的。本发明的方法简单、高效、可以降低分离糖基转移酶UGT1的生产成本，可以商业化获得甜度高、口感好、高价值的莱鲍迪苷D。
本发明公开了一种能够催化莱鲍迪苷A生成多种甜菊糖苷衍生物的糖基转移酶CaUGT，构建该酶在大肠杆菌重组中的重组菌，获得的重组酶粗酶液及纯化酶能将低值的催化莱鲍迪苷A生成高值的多种甜菊糖苷衍生物。其核酸序列为：a)SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；或与a)的核苷酸序列不同，能够编码SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的核苷酸序列。将该酶基因克隆到大肠杆菌表达载体上，实现了该酶在大肠杆菌中的异源表达，获得的重组蛋白CaUGT实现了以UDPG为糖基供体，催化底物莱鲍迪苷A直接生成莱鲍迪苷D、莱鲍迪苷I和莱鲍迪苷M2，能一步将低值的甜菊糖苷转化为高值的甜菊糖苷，对生化法绿色转化高值甜菊糖苷的产业经济具有重大意义。
