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[发明专利]一种无三羧酸循环的大肠杆菌底盘菌及其构建方法与应用-CN202010564730.X有效
发明人： 林白雪;周航;张译文;钟晓彤;刘洁铮;陶勇 -专利权人：中国科学院微生物研究所
申请日： 2020-06-19 - 公布日： 2023-08-11 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种无三羧酸循环的大肠杆菌底盘菌及其构建方法与应用。该大肠杆菌底盘菌的制备方法为：提高宿主菌(大肠杆菌或突变型大肠杆菌)中四氢吡啶二羧酸：N‑乙酰转移酶、N‑乙酰二氨基庚二酸脱乙酰基酶、N‑乙酰二氨基庚二酸氨基转移酶、O‑乙酰同型丝氨酸硫解酶和同型丝氨酸：O‑乙酰转移酶的表达量和/或活性，且降低所述宿主菌中四氢吡啶二羧酸：N‑琥珀酰转移酶和同型丝氨酸：O‑琥珀酰转移酶的表达量和/或活性，从而获得无三羧酸循环的大肠杆菌底盘菌。实验证明，该大肠杆菌底盘菌可以减少碳丢失率，提高以中心代谢中间产物(如乙酰辅酶A、丙酮酸、α‑酮戊二酸)为前体合成目标产品的能力。本发明具有重要的应用价值。
一种羧酸循环大肠杆菌底盘及其构建方法应用

[发明专利]生产L-天冬氨酸的平台菌、基于该平台菌构建的生产β-丙氨酸的重组菌及其构建方法-CN201910270484.4有效
发明人：刘伟丰;朴晓宇;林白雪;陶勇 -专利权人：中国科学院微生物研究所
申请日： 2019-04-04 - 公布日： 2022-11-01 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了生产L‑天冬氨酸的平台菌、基于该平台菌构建的生产β‑丙氨酸的重组菌及其构建方法。通过改变大肠杆菌的葡萄糖摄入途径及糖酵解途径使磷酸烯醇式丙酮酸大量积累，进而增强固碳途径以获得大量的前体物质草酰乙酸，加强L‑天冬氨酸合成途径相关基因靶点，通过引入辅因子循环系统解决共底物不足的问题，并改造中心代谢途径三羧酸循环以及敲除副产物竞争旁路，从而获得平台菌；基于该平台菌通过增强天冬氨酸脱羧酶的表达，获得重组菌。平台菌能够合成50.10±2.10mM L‑asp，转化率达到1.00M/M葡萄糖；重组菌能够合成76.01±2.80mM β‑丙氨酸，转化率为1.52M/M葡萄糖。本发明具有重要应用价值。
生产天冬氨酸平台基于构建丙氨酸重组及其方法

[发明专利]产丙谷二肽的工程菌及其构建方法与应用-CN201911164379.9有效
发明人： 林白雪;朱江明;陶勇 -专利权人：中国科学院微生物研究所
申请日： 2019-11-25 - 公布日： 2022-09-16 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了丙谷二肽的工程菌及其构建方法与应用。本发明提供了一种产丙谷二肽的基因工程菌的构建方法，包括如下步骤：将L‑氨基酸‑α‑连接酶的编码基因和/或谷氨酰胺合成酶的编码基因导入受体菌，得到产丙谷二肽的基因工程菌。本发明通过全细胞催化合成丙谷二肽。本方案操作简单；无需氨基酸保护；反应条件温和；无需使用有毒试剂，环境友好；副产物少，大大降低了下游纯化成本。
产丙谷二肽工程及其构建方法应用

[发明专利]一种产MK-7的重组大肠杆菌及其构建方法和应用-CN201911210070.9有效
发明人： 林白雪;高全秀;陶勇 -专利权人：中国科学院微生物研究所
申请日： 2019-11-28 - 公布日： 2022-09-16 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种产MK‑7的重组大肠杆菌及其构建方法和应用。本发明首先公开了重组大肠杆菌的构建方法，包括将与MK‑7合成相关的基因和/或1，2‑二酰甘油3‑葡糖基转移酶基因导入受体大肠杆菌，得到重组大肠杆菌；所述受体大肠杆菌为大肠杆菌突变体或野生型大肠杆菌。进一步公开了上述构建的重组大肠杆菌及其在制备MK‑7中的应用。本发明首次实现了大肠杆菌产MK‑7，所用原料相对低廉，易于工业化大规模生产；本发明构建得到的产MK‑7的重组大肠杆菌，可以减少发酵所需时间，提高生产效率；同时利用代谢工程原理，进行菌种改造，大大提高了MK‑7的产量，对于MK‑7生产具有重要的应用价值。
一种 mk 重组大肠杆菌及其构建方法应用

[发明专利]产L-谷氨酰胺的重组大肠杆菌及其构建方法与应用-CN201911362098.4有效
发明人： 林白雪;朱江明;陶勇 -专利权人：中国科学院微生物研究所
申请日： 2019-12-25 - 公布日： 2022-09-16 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种产L‑谷氨酰胺的重组大肠杆菌及其构建方法与应用。本发明首先公开了重组大肠杆菌，其与作为出发菌的大肠杆菌相比，谷氨酰胺合成酶的基因的表达量和/或含量和/或活性增加，和/或下述蛋白质的基因的表达量和/或含量和/或活性降低；所述蛋白质为如下至少一种：谷氨酰胺酶A；谷氨酰胺酶B；同时具备谷氨酰胺合成酶腺嘌呤转移酶活性和谷氨酰胺合成酶去腺苷化活性的双功能酶；肉豆蔻酰载体蛋白依赖性酰基转移酶；PII‑1蛋白。进一步提供了制备L‑谷氨酰胺的方法。本发明通过在大肠杆菌中过表达谷氨酰胺合成酶的基因，同时阻断旁路途径，开发了一套以L‑谷氨酸为底物高效合成游离L‑谷氨酰胺的方法。
谷氨酰胺重组大肠杆菌及其构建方法应用

[发明专利]产胍基乙酸的工程菌及其构建方法与应用-CN201910247604.9有效
发明人： 林白雪;张译文;周航;陶勇 -专利权人：中国科学院微生物研究所
申请日： 2019-03-29 - 公布日： 2022-07-05 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了产胍基乙酸的基因工程菌及其构建方法与应用。本发明提供了一种产胍基乙酸工程菌的构建方法，包括如下步骤：将与胍基乙酸合成相关基因L‑精氨酸：甘氨酸脒基转移酶编码基因导入宿主菌，得到产胍基乙酸工程菌；所述宿主菌为大肠杆菌或突变型大肠杆菌。本发明通过表达外源蛋白的方法，在大肠杆菌中构建了本底不存在的AGAT催化反应。同时，通过质粒过表达蛋白、染色体上替换启动子及基因敲除等方式，增强大肠杆菌鸟氨酸循环代谢通路的流量，解除鸟氨酸对AGAT催化反应的抑制，利用全细胞催化法循环利用精氨酸生产胍基乙酸，具有良好的环境与经济前景。
产胍基乙酸工程及其构建方法应用

[发明专利]产左旋肉碱的重组菌及其构建方法与应用-CN201811252374.7有效
发明人： 林白雪;梁秀君;朴晓宇;张莎莎;陶勇 -专利权人：中国科学院微生物研究所
申请日： 2018-10-25 - 公布日： 2022-04-05 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了产左旋肉碱的重组菌及其构建方法与应用。本发明的重组菌是将γ‑丁基甜菜碱羟化酶基因和肉碱转运蛋白基因导入受体菌得到产左旋肉碱的重组菌或将γ‑丁基甜菜碱羟化酶基因导入受体菌得到产左旋肉碱的重组菌；所述受体菌为突变型大肠杆菌或野生型大肠杆菌。本发明在大肠杆菌中实现了左旋肉碱的生产，并通过代谢工程手段提高了左旋肉碱的产量。
产左旋肉碱重组及其构建方法应用

[发明专利]产L-鼠李糖的工程菌及其构建方法与应用-CN201810517051.X有效
发明人： 林白雪;张莎莎;史从容;陶勇 -专利权人：中国科学院微生物研究所
申请日： 2018-05-25 - 公布日： 2021-11-16 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了产L‑鼠李糖的工程菌及其构建方法与应用。本发明通过在大肠杆菌中过表达与L‑鼠李糖合成相关基因，增强L‑鼠李糖的合成通路，同时通过旁路途径的阻断，增加了前体L‑乳醛的积累量，开发了一套高效全细胞催化合成游离L‑鼠李糖的方法，首次实现在大肠杆菌中以葡萄糖为单一底物合成L‑鼠李糖。通过这种方式可以以廉价葡萄糖为原料，用大肠杆菌全细胞催化高效合成L‑鼠李糖，不仅合成的鼠李糖为游离态，避免了复杂的水解步骤，可直接用于分离纯化，而且得到的产物中也不含有其他单糖或蛋白质，减轻了后续分离纯化的负担。
鼠李糖工程及其构建方法应用

[发明专利]产N-乙酰谷氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用-CN201810789222.4有效
发明人： 林白雪;张莎莎;杨巍;王鹏超;陶勇 -专利权人：中国科学院微生物研究所
申请日： 2018-07-18 - 公布日： 2021-09-03 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种产N‑乙酰谷氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用。本发明所提供的产N‑乙酰谷氨酸的基因工程菌的构建方法包括：将N‑乙酰谷氨酸合成酶基因导入宿主菌得到产N‑乙酰谷氨酸(NAG)的重组菌，通过阻断N‑乙酰谷氨酸分解代谢途径，以及改善前体乙酰辅酶A的供应提高NAG的产量。利用本发明所构建的产NAG的基因工程菌生产NAG，具有以下优点：通过导入优良性状的N‑乙酰谷氨酸合成酶得到能够产NAG的工程菌；通过阻断N‑乙酰谷氨酸分解代谢途径使NAG得以高效积累；通过前体乙酰辅酶A供应的改善，提高了NAG的合成效率。实验证明，本发明所制备的产N‑乙酰谷氨酸的重组菌可以高效地合成N‑乙酰谷氨酸。
乙酰谷氨酸基因工程及其构建方法应用

[发明专利]产N-乙酰氨基葡萄糖工程菌株的构建与应用-CN201910763311.6在审
发明人： 林白雪;王鹏超;张译元;陶勇 -专利权人：中国科学院微生物研究所
申请日： 2019-08-19 - 公布日： 2021-02-09 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了产N‑乙酰氨基葡萄糖工程菌株的构建与应用。本发明提供了产N‑乙酰氨基葡萄糖工程菌的构建方法，本发明通过敲除大肠杆菌中N‑乙酰氨基葡萄糖的转运降解途径提高大肠杆菌积累N‑乙酰氨基葡萄糖能力；弱化糖酵解途径对N‑乙酰氨基葡萄糖合成前体果糖‑6‑磷酸的利用，从而提高N‑乙酰氨基葡萄糖合成前提物质供应；进一步通过对大肠杆菌无机氨摄取系统的改造并过表达谷氨酰胺合酶提高N‑乙酰氨基葡萄糖合成途径辅因子的供应进一步提高的大肠杆菌产物合成水平。通过对高密度发酵和全细胞转化工艺的优化，使N‑乙酰氨基葡萄糖合成达到112/L，高于目前国内文献报道水平。
乙酰氨基葡萄糖工程菌株构建应用

[实用新型]一种污泥处理用板框压滤机的卸料装置-CN202020574116.7有效
发明人：陶勇;林金新;林白雪;胡美荣 -专利权人：农博士（福建）生物技术有限公司
申请日： 2020-04-17 - 公布日： 2021-02-05 - 主分类号： B01D25/32 文献下载
摘要：本实用新型公开一种污泥处理用板框压滤机的卸料装置，包括支撑总成和移动总成，所述支撑总成包括纵向框架、横向框架和竖直方向的立架和支脚，所述移动总成包括水平移动组件和竖直移动部件，所述竖直移动组件包括刮板、若干高压气扫喷头、安装所述刮板和高压气扫喷头的升降板和伸缩架；所述刮板平行设置于高压气扫喷头上方，所述升降板与所述伸缩架相连接。本实用新型产生的有益效果：本实用新型减少了对化学物质的使用同时亦缩短了清洁时间，提高了生产效率；刮掉了残留在压滤机的边框上的物料，提高了后续循环压滤工作时相邻滤板之间的密封性能，有效地避免了跑冒滴漏的现象；可对不同粘度的污垢进行清理，适用范围较广，具有较好的实用性。
一种污泥处理用板框压滤卸料装置

[发明专利]产D-苯乳酸的基因工程菌及其构建方法与应用-CN201710623316.X有效
发明人：杨欣伟;黄建忠;陶勇;林白雪;柯崇榕;王鹏超 -专利权人：福建师范大学
申请日： 2017-07-27 - 公布日： 2021-01-01 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了产D‑苯乳酸的基因工程菌及其构建方法与应用。本发明所提供的包括如下步骤：将与D‑苯乳酸合成相关的基因导入宿主菌得到产D‑苯乳酸的重组菌；所述与D‑苯乳酸合成相关的基因为芳香族氨基酸氨基转移酶的编码基因、D型乳酸脱氢酶的编码基因和NADH依赖型的谷氨酸脱氢酶的编码基因。利用本发明所构建的产D‑苯乳酸的基因工程菌生产D‑苯乳酸，具有以下优点：构建了一个辅因子循环体系，增加还原力的供应；使用谷氨酸、α‑酮戊二酸等添加物提高了辅因子循环效率，进而进一步提高了D‑苯乳酸的合成量；全细胞催化方法简化了D‑苯乳酸生产过程，生产周期短，因而将在今后的D‑苯乳酸的生产中占据了重要的地位。
乳酸基因工程及其构建方法应用

[实用新型]一种便于操作的离心装置-CN202020574105.9有效
发明人：陶勇;林金新;林白雪;胡美荣 -专利权人：农博士（福建）生物技术有限公司
申请日： 2020-04-17 - 公布日： 2021-01-01 - 主分类号： B04B5/04 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种便于操作的离心装置，包括机箱体，离心室和角转子组件，还包括可自动推送离心管的推送组件，所述推送组件包括用于承接离心管底部的离心管支撑部、用于推动离心管的伸缩杆和用于转接伸缩杆的伸缩杆承接部，所述角转子组件包括用于带动角转子转动的电机、角转子、用于装载离心管的离心管装载部、减少离心管与所述离心管装载部内壁碰撞的减震层和转子固定座；所述角转子组件设置于离心室内，所述转子固定座固定于所述离心室底部，所述减震层设置于所述离心管装载部的内壁，所述推送组件由固定底座固定于离心室底部。本实用新型减少了人工操作过程中失误对离心效果的影响的同时减少了离心管的损耗，提高了离心装置的工作效率。
一种便于操作离心装置

[实用新型]一种生物发酵用转化罐-CN202020573492.4有效
发明人：陶勇;林金新;林白雪;胡美荣 -专利权人：农博士（福建）生物技术有限公司
申请日： 2020-04-17 - 公布日： 2020-12-25 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种生物发酵用转化罐，包括转化罐主体部分和物料过滤部，所述转化罐主体部分包括第一出料口，第一出料口阀门，所述物料过滤部包括过滤组件、反冲洗喷头和清洗液输送管道；所述过滤组件设为多组，每组都包括过滤槽、第二出料口、过滤网板、第二出料口阀门，所述过滤槽设在所述第一出料口下方且入口与第一出料口连接；所述过滤网板设于过滤槽内，反冲洗喷头设于所述过滤网板下方；所述的清洗液输送管道与所述的反冲洗喷头相连；还包括综合物料出口，多组过滤组件的第二出料口汇接至所述的综合物料出口。本实用新型减少了设备投入，节约了生产所需成本；实现了对过滤槽的在线清洗，并且提高了工作效率；过滤网板拆卸方便。
一种生物发酵转化

[实用新型]一种用于生产γ-氨基丁酸的发酵罐-CN202020430824.3有效
发明人：陶勇;林金新;林白雪;胡美荣 -专利权人：农博士（福建）生物技术有限公司
申请日： 2020-03-30 - 公布日： 2020-12-25 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本实用新型提供一种用于生产γ‑氨基丁酸的发酵罐，属于γ‑氨基丁酸生产技术领域，包括发酵箱，发酵箱的底部设有发酵培养基、中部设有带有可开合的第一盖体的第一通孔、顶部开设有第二通孔，与第一通孔相连通的菌株种植管，通风装置包括穿过第二通孔的风管、与风管伸入发酵箱内部的一端固接并且与风管相连通的散风件，还包括稳流泵、过滤箱，稳流泵一端与发酵箱连通、一端与过滤箱连通，过滤箱的底部设有用于吸附树脂。有鉴于此，本申请提供一种用于生产γ‑氨基丁酸的发酵罐，在进行有氧发酵通风的时候不会直吹，不会造成菌株的堆积，生产效率高。同时经过多级过滤能富集到更纯净的γ‑氨基丁酸，操作简单。
一种用于生产氨基丁酸发酵

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