本发明涉及具有UDP‑糖基转移酶活性特别地具有UGT2活性并且与在SEQ ID NO:1、3、6、9、11、14、17、20、22、25中的一个中列出的氨基酸序列具有至少85%同一性的多肽。本申请还涉及包含编码所述多肽的重组核酸序列的重组宿主以及用其制备糖基化二萜如甜菊醇糖苷的用途。所述宿主细胞还可包含甜菊醇糖苷生物合成途径的酶。
本发明涉及具有贝壳杉烯酸13‑羟化酶活性的变体多肽,所述变体多肽包含氨基酸序列,当与包含SEQ ID NO:1所示序列的贝壳杉烯酸13‑羟化酶比对时,所述氨基酸序列包含对应于以下位置处的任何氨基酸的氨基酸残基的至少一个替换:72、85、108、127、129、141、172、195、196、197、199、226、236、291、302、361或464,所述位置是参照SEQ ID NO:1限定的,并且其中所述变体与具有贝壳杉烯酸13‑羟化酶活性的参照多肽相比具有一种或多种改变的性质。本发明的变体多肽可用于重组宿主中以生产甜菊醇或甜菊醇糖苷。
本发明涉及具有UDP‑糖基转移酶活性特别地具有UGT2活性并且与在SEQ ID NO:1、3、6、9、11、14、17、20、22、25中的一个中列出的氨基酸序列具有至少85%同一性的多肽。本申请还涉及包含编码所述多肽的重组核酸序列的重组宿主以及用其制备糖基化二萜如甜菊醇糖苷的用途。所述宿主细胞还可包含甜菊醇糖苷生物合成途径的酶。
一种能够产生甜菊醇糖苷的重组宿主,所述重组宿主过表达介导甜菊醇糖苷转运的多肽,所述多肽包含SEQ ID NO:35或SEQ ID NO:38所示的氨基酸序列或与二者之任一具有至少约50%序列同一性的氨基酸序列。一种能够产生甜菊醇糖苷的重组宿主,所述重组宿主已被修饰,优选在其基因组中被修饰,以导致介导甜菊醇糖苷转运的多肽的产生缺陷,并且所述多肽包含SEQ ID NO:35或SEQ ID NO:38所示的氨基酸序列或与二者之任一具有至少约50%序列同一性的氨基酸序列。
一种能够产生甜菊醇糖苷的重组宿主,所述重组宿主过表达介导甜菊醇糖苷转运的多肽,所述多肽包含SEQ ID NO:29所示的氨基酸序列或与其具有至少约50%序列同一性的氨基酸序列。一种能够产生甜菊醇糖苷的重组宿主,所述重组宿主已被修饰,优选在其基因组中被修饰,以导致介导甜菊醇糖苷转运的多肽的产生缺陷,并且所述多肽包含SEQ ID NO:29所示的氨基酸序列或与其具有至少约50%序列同一性的氨基酸序列。
一种能够产生甜菊醇糖苷的重组宿主,所述重组宿主过表达介导甜菊醇糖苷转运的多肽,所述多肽包含SEQ ID NO:29所示的氨基酸序列或与其具有至少约50%序列同一性的氨基酸序列。一种能够产生甜菊醇糖苷的重组宿主,所述重组宿主已被修饰,优选在其基因组中被修饰,以导致介导甜菊醇糖苷转运的多肽的产生缺陷,并且所述多肽包含SEQ ID NO:29所示的氨基酸序列或与其具有至少约50%序列同一性的氨基酸序列。
本发明涉及具有贝壳杉烯酸13‑羟化酶活性的多肽,该多肽包含氨基酸序列,当与包含SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:3所示序列的贝壳杉烯酸13‑羟化酶比对时,该氨基酸序列包含对应于位置136、248、336或403的任何氨基酸的至少一个氨基酸的替换,所述位置是参考SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:3定义的,其中该多肽与具有贝壳杉烯酸13‑羟化酶活性的参考多肽相比具有一种或多种改变的特性。本发明的多肽可以在重组宿主中用于产生甜菊醇或甜菊醇糖苷。
本发明涉及具有香叶基香叶基焦磷酸酯合酶活性的变体多肽,所述变体多肽包含氨基酸序列,当与包含SEQ ID NO:1所示序列的香叶基香叶基焦磷酸酯合酶比对时,所述氨基酸序列包含至少一个对应于位置92、100或235的任何氨基酸的氨基酸残基的取代,所述位置是参考SEQ ID NO:1定义的,并且其中所述变体与具有香叶基香叶基焦磷酸酯合酶活性的参考多肽相比具有一种或多种修饰的性质。本发明的变体多肽可用于重组宿主中以生产甜菊醇或甜菊醇糖苷。