本发明公开了一种2,6‑二氯嘌呤核苷的制备方法及酶。本发明公开了一种酶，该酶的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示。本发明还公开了一种2,6‑二氯嘌呤核苷的制备方法，其包括下述步骤：在缓冲液中，将式(I)所示化合物和2,6‑二氯嘌呤在酶的存在下通过如下反应制得2,6‑二氯嘌呤核苷，即可；所述的酶的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示。使用该方法制备2,6‑二氯嘌呤核苷时，操作简单，成本低，污染少，并且不需要引入保护基团。
本发明公开了一种转氨酶突变体及其应用。该转氨酶突变体的氨基酸序列是SEQ ID NO：1所示氨基酸序列发生突变的氨基酸序列，突变的氨基酸位点选自F89、K193、P243、V234、I262、Q280、V379、R416、A417及C418中的一个或多个。具有上述至少一个突变位点的转氨酶突变体，其酶活性和/或稳定性大大提高。
本发明公开了一种酮还原酶突变体及其应用。该酮还原酶突变体的氨基酸序列是由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列发生突变得到的氨基酸序列，突变至少包括如下突变位点之一：第6位、第94位、第96位、第117位、第144位、第156位、第193位、第205位、第224位、第176位、第85位和第108位；或者酮还原酶突变体的氨基酸序列具有发生突变的氨基酸序列中的突变位点，且与发生突变的氨基酸序列具有80％以上同源性的氨基酸序列。本发明酮还原酶突变体的稳定性高，尤其是对于丙酮和异丙醇的耐受性，使得它们在手性羟基杂环类物质的制备中，反应体系成分简化，成本降低，制备的手性醇ee值甚至高达99.8％。
本发明公开了一种转氨酶突变体及其应用。该转氨酶突变体的氨基酸序列是SEQ ID NO：1所示氨基酸序列发生突变的氨基酸序列，突变的氨基酸位点选自F89、K193、P243、V234、I262、Q280、V379、R416、A417及C418中的一个或多个。具有上述至少一个突变位点的转氨酶突变体，其酶活性和/或稳定性大大提高。
本发明提供了一种转氨酶突变体及其应用。该转氨酶突变体的氨基酸序列是SEQ ID NO：1所示氨基酸序列发生突变的氨基酸序列，突变的氨基酸位点包括T7C+S47C位点。具有上述突变位点的转氨酶突变体，其酶活性和/或稳定性大大提高，能够在相对极端的环境中应用。而且，具有上述突变位点的转氨酶突变体可以进一步通过固定化技术制备成固定化酶，且其固定化酶的活力和稳定性较高，能够被多次回收再利用，适合应用于填充床连续流反应。
