本发明提供了一种谷胱甘肽双功能合成酶突变体，属于生物技术领域。所述谷胱甘肽双功能合成酶突变体选自如下任一种：其氨基酸序列由SEQ ID NO.1所示序列突变获得，所述突变为选自如下一个或多个氨基酸残基位点发生突变：14位、47位、49位、92位、107位、113位、136位、206位、230位、250位、251位、258位、269位、313位、345位、363位、373位、414位、416位、510位、531位。本申请通过对双功能谷胱甘肽合成酶StGshF的氨基酸序列(SEQ ID NO.1)进行定点突变，获得的单突变体，以及两个位点突变获得的双突变体，其酶活和热稳定性相较于野生型均具有显著提升。本申请提供的酶突变体，在生产谷胱甘肽以及构建生产谷胱甘肽的基因工程微生物中具有广阔的应用前景。
