本发明公开了蛋白质及其在制备隐丹参酮中的应用。本发明公开的蛋白质其名称为CYP71D375a,是下述A1)、A2)或A3):A1)氨基酸序列是SEQ ID No.2的蛋白质;A2)将序列表中SEQ ID No.2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质;A3)在A1)或A2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。蛋白质CYP71D375a可以催化丹参新酮生成隐丹参酮,对于调节和生产丹参酮类化合物及培育高品质的丹参具有重要的理论及实际意义。
本发明公开了一种SmCPS4蛋白及其编码基因与应用。本发明公开的一种蛋白,为如下(1)或(2)所示:(1)SEQ ID No.3所示的蛋白;(2)将SEQ ID No.3所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且功能相同的蛋白质。本发明公开的SmCPS4基因与丹参中另一个SmKSL2基因联合,介导催化形成丹参中一种新的半日花烷型二萜类化合物13-epi-manoyl oxide,这两个基因是首次发现的植物中能催化形成13-epi-manoyl oxide结构类型的二萜合酶基因,该合成途径的解析为利用合成生物学生产类似化合物,深入研究此类化合物的药理作用提供了重要的基础。
本发明公开了一种细胞色素P450(SmP450)基因及其编码的蛋白酶和用途,该基因为首次利用cDNA芯片技术从丹参中克隆而得,填补了从我国传统名贵中药材丹参中分离克隆出结构修饰型功能基因:细胞色素P450(SmP450)基因的空白。本发明所提供的细胞色素P450(SmP450)基因具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列或者添加、取代、插入或缺失一个或多个核苷酸的同源序列或其等位基因及其衍生的核苷酸序列。所述基因编码的蛋白质具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列或者添加、取代、插入或缺失一个或多个氨基酸的同源序列。本发明提供的细胞色素P450(SmP450)基因可以通过生物技术提高丹参中二萜类活性成分丹参酮类的含量,有助于丹参药材的品质改良,同时可以进行品种选育,具有很好的应用前景。
本发明公开了一种鲨烯合酶基因及其编码的蛋白酶与用途,该基因为首次利用同源克隆技术从丹参中克隆而得,填补了从我国传统名贵中药材丹参中分离克隆出鲨烯合酶基因的空白。本发明所提供的鲨烯合酶基因具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列或者添加、取代、插入或缺失一个或多个核苷酸的同源序列或其等位基因及其衍生的核苷酸序列。所述基因编码的蛋白质具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列或者添加、取代、插入或缺失一个或多个氨基酸的同源序列。本发明提供的鲨烯合酶基因可以通过生物技术提高植物中三萜皂苷类成分的含量,同时可用RNAi技术提高丹参中二萜类(丹参酮类)物质含量的提高。本发明在药用植物次生代谢工程研究和产业化方面具有很好的应用前景。
本发明公开了一种法呢基焦磷酸合酶基因及其编码的蛋白酶与用途,该基因为首次利用cDNA芯片技术从丹参中克隆而得,填补了从我国传统名贵中药材丹参中分离克隆出法呢基焦磷酸合酶基因的空白。本发明所提供的法呢基焦磷酸合酶基因具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列或者添加、取代、插入或缺失一个或多个核苷酸的同源序列或其等位基因及其衍生的核苷酸序列。所述基因编码的蛋白质具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列或者添加、取代、插入或缺失一个或多个氨基酸的同源序列。本发明提供的法呢基焦磷酸合酶基因可以通过生物技术提高丹参中二萜类活性成分丹参酮类的含量,有助于丹参药材的品质改良,同时可以进行品种选育,具有很好的应用前景。