本发明涉及花生脂酰‑酰基载体蛋白硫酯酶AhFATB2基因启动子及其制备方法和应用。该启动子为序列表中SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。本发明从花生中克隆出脂酰‑酰基载体蛋白硫酯酶AhFATB2基因的启动子,利用本发明提供的启动子构建重组表达载体,然后将所述表达载体利用农杆菌介导的方法转化拟南芥,启动下游重组基因在种子、子叶、下胚轴、根、花粉、叶片中表达,是一个类似于组成型的启动子,可以应用于转基因提高作物的抗病性、抗逆性、抗虫性,可将其应用于转基因工程中,使得目的基因表达产物在上述各个植物组织中积累,增加组织中的表达量,发挥更好效果,因此在基因工程育种及转基因研究中具有重要的应用价值。