一种鼠李糖苷酶突变体及其制备方法和应用,本发明涉及生物医药技术领域,包括将氨基酸序列为如SEQ ID NO:1所示的鼠李糖苷酶的突变位点突变为丙氨酸得到的突变体,所述突变位点为第512位的色氨酸、第570位的组氨酸和第579位的赖氨酸中两个以上的组合。本发明的一种鼠李糖苷酶突变体,通过定点突变技术构建α‑L‑鼠李糖苷酶TpeRha的组合突变体,催化转化淫羊藿总黄酮中的多组分黄酮糖苷制备淫羊藿次苷Ⅰ组合物,酶解时间短,转化率高。
一种鼠李糖苷酶TpeRha‑H570A突变体及其制备方法和应用,本发明涉及生物医药技术领域,为将氨基酸序列为如SEQ ID NO:2所示的TpeRha酶的第570位的组氨酸突变为丙氨酸。鼠李糖苷酶TpeRha‑H570A突变体在催化水解淫羊藿苷生成淫羊藿次苷Ⅰ的应用中展示出高度专一性,其产物转化率比野生型TpeRha酶提高15.63倍。所述鼠李糖苷酶TpeRha‑H570A突变体能应用于生物炮制制备不同组分含量的淫羊藿提取物,酶解时间短,转化率高。
一种鼠李糖苷酶TpeRha突变体及其制备方法和应用,本发明涉及生物医药技术领域,为突变体TpeRha‑R369A、突变体TpeRha‑W512A和突变体TpeRha‑K579A中的任一种;所述突变体TpeRha‑R369A,为将氨基酸序列为如SEQ ID NO:1所示的TpeRha酶的第369位的精氨酸突变为丙氨酸;所述突变体TpeRha‑W512A,为将氨基酸序列为所述TpeRha酶的第512位的色氨酸突变为丙氨酸。本发明通过定点突变技术构建α‑L‑鼠李糖苷酶TpeRha的组合突变体,催化转化淫羊藿总黄酮中的多组分黄酮糖苷制备淫羊藿次苷Ⅰ组合物,酶解时间短,转化率高。