本发明公开了一种多重PCR引物组,由用于扩增链球菌(SS)GDH基因、大肠杆菌(E.coli)ompA基因、胸膜肺炎放线杆菌(APP)APXⅣA基因、巴氏杆菌(Pm)KMT1基因、副猪嗜血杆菌(HPS)ompP2基因的特异性上游引物及下游引物组成,各引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑10所示,本发明还公开了该引物组在制备猪呼吸道病原检测试剂盒中的应用以及一种检测猪呼吸道病原的方法。本发明实现了对SS、E.coli、APP、Pm、HPS五种猪呼吸道病原的单管一次性PCR检测,具有准确性高、特异性强、灵敏性好等优点。
本发明公开了弓形虫TGME49_229320蛋白在制备弓形虫病诊断试剂盒中的应用,所述弓形虫TGME49_229320蛋白的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,本发明还公开了一种弓形虫病诊断试剂盒以及一种非诊断目的检测弓形虫的间接ELISA方法,属于分子生物学领域。本发明为弓形虫的病原检测和防控提供了更多的候选抗原,所建立的方法能特异性检测弓形虫卵囊感染的抗体血清,同时还具有准确性好、敏感性强等优点。
本发明公开一种弓形虫微线体蛋白MIC17a及其应用,所述弓形虫微线体蛋白MIC17a的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示;编码该弓形虫微线体蛋白的基因MIC17a,其核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明以该蛋白制备得到的间接酶联免疫试剂盒在检测猫弓形虫病中具有灵敏度高、特异性强、准确性好等特点。
本发明公开了一种弓形虫基因敲除虫株,该虫株缺失核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的弓形虫致密颗粒家族蛋白基因(TGME49_299780基因),本发明还公开了该虫株的构建方法,属于生物及基因工程领域。本发明构建的基因敲除虫株ME49Δ299780具有毒力小,在动物体内繁殖少等优点,能提高动物对弓形虫的免疫能力,有成为抗弓形虫基因工程疫苗的潜力。
本发明公开了一种弓形虫基因敲除虫株的构建方法,该方法敲除了弓形虫α淀粉酶基因,所述α淀粉酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,所述弓形虫基因敲除虫株在α淀粉酶位点具有如SEQ ID NO:2所示核苷酸序列。该基因敲除虫株具有毒力小,在动物体内繁殖少等优点,能提高动物对弓形虫的免疫能力,有成为抗弓形虫基因工程疫苗的潜力。
本发明公开了一种弓形虫基因敲除虫株的构建方法,该方法敲除了弓形虫腺苷酸琥珀酸酶基因,所述腺苷酸琥珀酸酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,所述弓形虫基因敲除虫株在腺苷酸琥珀酸酶位点具有如SEQ ID NO:2所示核苷酸序列。该基因敲除虫株具有毒力小的优点,能提高动物对弓形虫的免疫能力,有成为抗弓形虫基因工程疫苗的潜力。
本发明公开了一种非洲猪瘟病毒的LAMP特异性检测引物,包括一组外引物和一组内引物,所述外引物和内引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2‑5所示。本发明还公开一种非洲猪瘟病毒的LAMP非诊断目检测方法,该方法包括根据非洲猪瘟病毒的P30基因设计LAMP检测引物的步骤。本发明具有经济便捷、灵敏度高、结果易于分辨等特点,可用于非洲猪瘟的快速临床诊断,减少疾病的传播和蔓延,同时还能用于非洲猪瘟病毒的非诊断目的实验室筛查、鉴定,为病毒的基础研究提供了一种有力工具。