本发明公开了重组成纤维细胞生长因子21突变体及编码基因；重组成纤维细胞生长因子21的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，重组成纤维细胞生长因子21突变体为下列之一：SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的100位的亮氨酸突变为精氨酸；SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的119位的脯氨酸突变为精氨酸或SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的125位的组氨酸突变为精氨酸。实验证明：本发明的重组成纤维细胞生长因子21突变体能提高诱导下游基因cFos和Egr1表达的水平,具有治疗二型糖尿病、肥胖症等代谢疾病的潜力。
本发明公开了一种高热稳定性的单链甜蛋白的突变体及基因，所述突变体是SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第5位异亮氨酸(I)突变为谷氨酸(E)，第23位的谷氨酸(E)突变为丙氨酸(A)，第26位的异亮氨酸(I)突变为精氨酸(R)，第65位的酪氨酸(Y)突变为异亮氨酸(I)，第83的甘氨酸(G)突变为谷氨酸(E)和第90位的天冬酰胺(N)突变为天冬氨酸(D)；本发明基于结构分析和蛋白质稳定性计算辅助设计，对单链甜蛋白定点突变，获得了一种高热稳定性的单链甜蛋白的突变体，与单链甜蛋白相比，本发明的高热稳定性的单链甜蛋白的突变体的Tm提高了18.4℃以上，并保持甜味。
本发明公开了一种高热稳定性的单链甜蛋白的突变体、基因及重组菌，所述突变体是SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第5位异亮氨酸(I)突变为谷氨酸(E)、第23位的谷氨酸(E)突变为丙氨酸(A)，第26位的异亮氨酸(I)突变为精氨酸(R)、第41位的半胱氨酸(C)突变为丙氨酸(A)，第65位的酪氨酸(Y)突变为异亮氨酸(I)，第83的甘氨酸(G)突变为精氨酸(R)和第90位的天冬酰胺(N)突变为谷氨酸(E)，本发明基于结构分析和蛋白质稳定性计算辅助设计，对单链甜蛋白定点突变，获得了一种高热稳定性的单链甜蛋白的突变体，与单链甜蛋白相比，本发明的高热稳定性的单链甜蛋白的突变体的Tm提高了20.4℃以上，并保持甜味。
本发明公开了一种高热稳定性的单链甜蛋白的突变体、基因及工程菌，所述突变体是SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第5位异亮氨酸(I)突变为谷氨酸(E)，第23位的谷氨酸(E)突变为丙氨酸(A)，第26位的异亮氨酸(I)突变为精氨酸(R)，第65位的酪氨酸(Y)突变为异亮氨酸(I)，第83的甘氨酸(G)突变为谷氨酸(E)和第90位的天冬酰胺(N)突变为谷氨酸(E)；本发明基于结构分析和蛋白质稳定性计算辅助设计，对单链甜蛋白定点突变，获得了一种高热稳定性的单链甜蛋白的突变体，与单链甜蛋白相比，本发明的高热稳定性的单链甜蛋白的突变体的Tm提高了18.4℃以上，并保持甜味。
本发明公开了高热稳定性的单链甜蛋白的突变体及基因，所述突变体是SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第5位异亮氨酸(I)突变为谷氨酸(E)、第23位的谷氨酸(E)突变为丙氨酸(A)，第26位的异亮氨酸(I)突变为精氨酸(R)，第65位的酪氨酸(Y)突变为异亮氨酸(I)，第83的甘氨酸(G)突变为精氨酸(R)和第90位的天冬酰胺(N)突变为天冬氨酸(D)，本发明基于结构分析和蛋白质稳定性计算辅助设计，对单链甜蛋白定点突变，获得了一种高热稳定性的单链甜蛋白的突变体，与单链甜蛋白相比，本发明的高热稳定性的单链甜蛋白的突变体的Tm提高了19.4℃以上，并保持甜味。
本发明公开了高热稳定性的单链甜蛋白的突变体、基因及工程菌，所述突变体是SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第5位异亮氨酸(I)突变为谷氨酸(E)，第23位的谷氨酸(E)突变为丙氨酸(A)，第26位的异亮氨酸(I)突变为精氨酸(R)，第65位的酪氨酸(Y)突变为异亮氨酸(I)，第83的甘氨酸(G)突变为精氨酸(R)和第90位的天冬酰胺(N)突变为谷氨酸(E)；本发明基于结构分析和蛋白质稳定性计算辅助设计，对单链甜蛋白定点突变，获得了一种高热稳定性的单链甜蛋白的突变体，与单链甜蛋白相比，本发明的高热稳定性的单链甜蛋白的突变体的Tm提高了19.4℃以上，并保持甜味。
本发明公开了一种高活性酪氨酸酚裂解酶突变体，是在SEQ ID NO.1所示的酪氨酸酚裂解酶的氨基酸序列的第206位丙氨酸突变为丝氨酸，第202位谷氨酸突变为苏氨酸和第201精氨酸突变为酪氨酸；所述一种高活性的酪氨酸酚裂解酶突变体的氨基酸序列如SEQ IDNO.3所示。本发明的高活性的酪氨酸酚裂解酶突变体，其酶活相较于野生型酪氨酸酚裂解酶提高了153％，可以节约成本。
本发明涉及一种羟脯氨酸修饰的重组Ⅲ型人源化胶原蛋白片段，为如下蛋白片段中的任一种：蛋白片段a：其包含n个串联的如SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的重复单体，n≥1；其中至少1个重复单体中的至少1个脯氨酸被羟脯氨酸替代；蛋白片段b：与蛋白片段a具有83‑97%同一性且保留蛋白片段a的细胞黏附性能；蛋白片段c：对蛋白片段a的氨基酸序列进行修饰后得到的保留蛋白片段a的细胞黏附性能。本发明的人源化胶原蛋白片段同源性高，其严格遵守Gly‑X‑Y的重复序列，细胞黏附性和生物活性高，具有高的脯氨酸羟化率，结构稳定，在护肤品、皮肤修复敷料、植入剂、人工皮肤、医疗器械或保健食品中具有广泛应用前景。
