本发明公开一种基于PSP的适用于高通量测序中elRNA文库构建方法。包括以下步骤:(1)以elRNA为样品来源;(2)采用去除核糖体方法进行文库构建至PCR反应之前;(3)采用PSP文库富集技术进行两轮PCR扩增。在高通量测序中,随着该技术的发展,面临的样品问题越来越严重,在外泌体包裹的RNA中,尤其是外泌体大RNA(exosome large RNA,elRNA),含量相当稀少。针对这种情况,本发明借助于PSP文库富集技术,形成一种适用于elRNA的文库构建方法。该方法操作流程简单,能够获得满足高通量测序所需的文库。