本发明公开了本发明提供了一种重组溶组织梭菌II型胶原酶,包含溶组织梭菌II型胶原酶和连接到所述组织梭菌II型胶原酶N端的标签蛋白;所述标签蛋白包含肝片形吸虫钙结合蛋白(Fh8);优选地,所述肝片形吸虫钙结合蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO:2。本发明还提供了表达该重组溶组织梭菌II型胶原酶的表达载体和重组工程菌,同时还提供了溶组织梭菌II型胶原酶的制备方法。本发明的重组溶组织梭菌II型胶原酶能够高效表达,不形成包涵体,易于分离纯化,有利于溶组织梭菌II型胶原酶的工业化生产。
本发明提供了一种融合蛋白,所述融合蛋白由所述佐剂蛋白通过接头(Linker)或直接连接的方式与肿瘤相关抗原的N端或C端连接形成;其中,所述佐剂蛋白包含流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae,Hi)蛋白D或所述流感嗜血杆菌蛋白D的片段;所述肿瘤相关抗原包含氨基酸序列为SEQ ID NO:3的HER2蛋白质或其片段。本发明还提供了上述融合蛋白的制备方法及其应用。本发明制备的重组蛋白,能够抑制Blab/c小鼠体内HER2阳性乳腺癌细胞的增殖,或者延缓乳腺肿瘤的增长速度。