本发明涉及一种突变型Taq酶及其制备方法,所述突变型Taq酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明通过氨基酸突变位点Q592K、S612R、A643L、V649L、A689I、F697I、和V720I,得到突变型Taq酶,在相同条件下的检测中突变型Taq酶的活性较市售Taq酶的活性有明显的提高,同时在热稳定性方面,突变型Taq酶较市售Taq酶有明显改善。
本发明开发了一种新型的嵌合DNA聚合酶,在一些实施方式中,根据本发明设计的嵌合聚合酶具有基本上类似于第一DNA聚合酶的持续合成能力、延伸率和热稳定性以及基本上类似于第二DNA聚合酶的保真性。本发明的第一DNA聚合酶是KOD聚合酶SEQ ID No.1,第二DNA聚合酶是Pfu聚合酶SEQ ID No.2。本发明技术方案利用高保真DNA聚合酶中功能区切换,结合不同DNA聚合酶的期望的功能特性。本发明尤其提供了稳健、快速以及准确的DNA聚合酶,用于DNA扩增、合成、检测、测序以及其它重要的重组DNA技术。发明的创新的高保真DNA聚合酶是一种同时具有高保真性,高持续合成能力,高延伸率,热稳定性,对盐有耐受性的高保真DNA聚合酶。
一种青霉蛋白激发子EPTP及其在提高植物抗病性中的应用,本发明提供EPTP蛋白激发子的蛋白质序列为SEQ ID NO.2所示,分子量大小为19247 Da。EPTP诱导烟草叶片的苯丙氨酸解氨酶、过氧化物酶、多酚氧化酶的活性显著增加,同时该激发子诱导烟草过敏性反应过程中,过敏性反应标记基因hin1被诱导表达;半定量RT‑PCR结果表明,EPTP可以诱导烟草获得系统获得性抗性,引起烟草叶片抗性基因转录水平上调,并诱导水杨酸途径和茉莉酸途径相关抗性基因的表达。EPTP施用后可提高植物对病毒、病原菌的抗性,作用高效、对环境无污染,可减少化学农药使用量,作为植物免疫激活剂具有广阔的应用前景。