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[发明专利]一种菌种及制备方法、菌剂及进水污水处理方法-CN202111100824.2在审
发明人：龚小芝;孙杰;秦琪明;曹宗仑;杨晏泉 -专利权人：中国石油化工股份有限公司;中国石油化工股份有限公司北京化工研究院
申请日： 2021-09-18 - 公布日： 2023-03-24 - 主分类号： C12N1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种菌种及制备方法、菌剂及进水污水的处理方法。该菌种的制备方法包括以下步骤：(1)采用单因素法筛选碳源种类，从反应器的进水污水中分离菌种，将筛选得到的碳源种类作为培养基的碳源，并在所述培养基上进行菌种的初筛，得到初筛菌种；(2)将所述初筛的菌种进行挂膜培养，摘取所述膜上的存留菌种进行二次分离筛选并发酵培养。采用由该菌种制备的菌剂，在进行污水处理时具有菌种适应期短、配伍性好、专一性强等优点，显著增加了污水的处理效率，而且菌种成本低廉、方便取材，菌剂投加量低。
一种菌种制备方法进水污水处理

[发明专利]一种全程硝化菌的富集培养方法-CN202010646409.6有效
发明人：全哲学;蒋秋悦;夏飞;戴红 -专利权人：复旦大学
申请日： 2020-07-07 - 公布日： 2023-03-14 - 主分类号： C12N1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种全程硝化菌的富集培养方法，其包含以下步骤：S1，采用无菌滤膜过滤水体样品；S2，将无菌滤膜放置于添加有底物的富集培养基中培养，获得经富集培养的滤膜；底物包含氨或尿素；S3，采用新的无菌滤膜，作为转接滤膜，与经富集培养的滤膜共同放置于新的添加有底物的富集培养基中培养；转接滤膜与经富集培养的滤膜接触，使得全程硝化菌从经富集培养的滤膜转接到转接滤膜上；S4，取出转接滤膜，放置于新的添加有底物的富集培养基中培养；S5，将转接滤膜上的全程硝化菌继续采用滤膜转接若干次，以达到全程硝化菌富集培养的目的；培养过程中定期取出部分滤膜抽提DNA，进行定量PCR分析，以确认全程硝化菌的富集情况。
一种全程硝化富集培养方法

[发明专利]胞外囊泡纯化方法-CN202110676767.6有效
发明人：黄乾生;黄海宁;郭子晗;竹李婷 -专利权人：中国科学院城市环境研究所
申请日： 2021-06-17 - 公布日： 2023-03-14 - 主分类号： C12N1/02 文献下载
摘要：本公开提供一种大体积样液的胞外囊泡纯化方法。所述方法包括提供待制备胞外囊泡的样液，提取胞外囊泡；所述样液的体积以升计；将所述胞外囊泡加入排阻色谱柱中，等体积收集流下组分；选择并混合具有目标粒径或游离蛋白目标浓度的流下组分；将混合所得物转移至超滤管中离心，留取截留液，得到纯化胞外囊泡。所得胞外囊泡纯度高、可溶性杂蛋白污染小，实用性更加广泛，可满足后续NTA、电镜和蛋白组等分析。且操作简便，耗时短。
胞外囊泡纯化方法

[发明专利]一种提高葛根中黄酮类物质含量的微生物发酵方法-CN202211692776.5在审
发明人：夏凡;胡颜松;陈言爽 -专利权人：南京科技职业学院
申请日： 2022-12-28 - 公布日： 2023-03-07 - 主分类号： C12N1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高葛根中黄酮类物质含量的微生物发酵方法，包括以下步骤：步骤1：以腐木粉末为微生物样品来源筛选降解木质纤维素的真菌；步骤2：将干燥的葛根粉碎成粉末，过筛，加入发酵瓶中，再加入营养液，用蒸馏水调节含水率，灭菌；再将步骤1筛选的降解木质纤维素的真菌接种到营养液中，发酵瓶置于培养箱中培养。使用降解木质纤维素的真菌为发酵菌种，通过微生物的酶促反应，可将葛根细胞壁上的木质素、纤维素等大分子分解掉，以利于黄酮类物质等有效成分的溶出，葛根黄酮的提取率达22%以上。
一种提高葛根中黄酮类物质含量微生物发酵方法

[发明专利]假单胞菌的分离、富集培养方法及修复污染土壤的方法-CN202210981338.4在审
发明人：王华伟;蒋旭彤;张艳茹;宋菁;王亚楠;孙英杰;李书鹏;杨乐巍;刘渊文 -专利权人：青岛理工大学
申请日： 2022-08-16 - 公布日： 2023-03-07 - 主分类号： C12N1/02 文献下载
摘要：本申请公开了一种假单胞菌的分离、富集培养方法及修复污染土壤的方法。该假单胞菌的分离的方法包括：培养菌液步骤，将带有混合微生物群的水样加入到含盐度为1.5‑5%的营养肉汤中振荡培养，培养完成后将营养肉汤培养基中的菌液转接到PYCM培养基中继续培养；逐级稀释步骤，吸取PYCM中的菌液按菌液浓度梯度进行稀释；涂布步骤，将稀释后各浓度梯度的菌液等量均匀滴落在固体平板上表面，然后培养3d即可长出单个菌落；平板划线步骤，用接种环挑取单个菌落划线到固体平板上，反复多次划线传代培养，得到纯种菌株Pseudomonas sp.strain KW‑2。利用此菌株可有效提升砷和酞酸酯修复效果。
假单胞菌分离富集培养方法修复污染土壤

[发明专利]猪胸膜肺炎放线杆菌的选择性培养基及其制备方法和应用-CN202211574787.3在审
发明人：邓红玉;庄祥玲;余新武;邓政;丁能水;龚先贵;谢学范;吴有林 -专利权人：福建傲农生物科技集团股份有限公司;福建傲芯种业科技集团有限公司;南宁傲农育种技术有限公司;福建哈客生态农业有限公司
申请日： 2022-12-08 - 公布日： 2023-03-03 - 主分类号： C12N1/02 文献下载
摘要：本发明涉及微生物分离培养技术领域，尤其涉及一种猪胸膜肺炎放线杆菌的选择性培养基及其制备方法和应用，选择性培养基包括A组分和B组分，其中A组分的配方如下：蛋白胨、酵母膏、NaCl、结晶紫、3号胆盐、烟碱腺嘌呤二核苷酸、琼脂、制霉菌素、林可霉素，用氢氧化钠调节pH值为7.3±0.1；蒸馏水加至900mL；B组分为95‑100mL胎牛血清。该分离培养基与现有技术相比，分离率提高了1倍，分离时间缩短了2倍以上，同时对所分离得到的APP菌株的生物学特性没有影响，能够用于菌株的快速分离鉴定，降低分离鉴定成本，提高分离准确率。
胸膜肺炎放线杆菌选择性培养基及其制备方法应用

[发明专利]一种通过盐碱地扦插枝条招募林木促生抗逆内生真菌的方法-CN202211273853.3在审
发明人：钟非;季文惠;朱蓉;谢东青;李忻桐;刘国元;余春梅;陈艳红;连博琳;魏辉;张健 -专利权人：南通大学
申请日： 2022-10-18 - 公布日： 2023-03-03 - 主分类号： C12N1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种通过盐碱地扦插枝条招募林木促生抗逆内生真菌的方法，该方法在对盐碱地进行初步改良以适应林木扦插条生长后，通过林木扦插条从自然生态系统招募真菌，并从林木根系中进行分离纯化，得到具有促生抗逆潜力的内生真菌，有利于避免非土著真菌竞争能力弱、促生效果不稳定等问题。本发明的方法基于耐盐、产酸、溶磷、产IAA等能力测试，可系统评估筛选出的内生真菌促生抗逆潜力；通过构建植物‑真菌共培养体系对菌株及其组合进行验证，有利于提高筛选成功率。本发明的方法针对性强、筛选效率高，为充分开发利用逆境微生物资源提供了新的策略，在提高林木应对环境胁迫方面的应用前景广泛。
一种通过盐碱地扦插枝条招募林木促生抗逆内生真菌方法

[发明专利]一种用于酒精分解的芽孢菌选育方法-CN202110969199.9有效
发明人：韦柯柯;李胜;高文功;黄时海 -专利权人：广西南宁佰奥吉生物科技有限公司
申请日： 2021-08-23 - 公布日： 2023-02-28 - 主分类号： C12N1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于酒精分解的芽孢菌选育方法，方法包括以下步骤：S1、芽孢菌的液体菌种接种至选育装置内的培养基进行培育，接种量为6‑10％；培养基包括以下重量份原料：玉米粉30‑50g/L，葡萄糖5‑8g/L，蛋白胨5‑10g/L，龙爪果粉20‑40g/L，葛根粉20‑30g/L，硫酸镁0.1‑0.2g/L，磷酸二氢钠0.3‑0.8g/L，亚硫酸钠0.1‑0.3g/L；S2、步骤S1中的芽孢菌的液体菌培养24‑48h，温度为35‑40℃，然后培养液加入到酒精样品中，进行解酒能力筛选；S3、步骤S2中的酒精样品经离心，取上层溶液，然后再次重复根据S1和S2的步骤进行操作，至选育出适合的芽孢菌。本发明通过先培育芽孢菌，再进行解酒能力筛选，逐步选育出具有较高解酒能力的菌种，操作高效快捷；使用的选育装置能在相同环境下进行不同酒精度的分解对比筛选，提高选育效率。
一种用于酒精分解芽孢选育方法

[发明专利]一种筛选产生物表面活性剂兼性厌氧菌的方法-CN202010327851.2有效
发明人：牟伯中;解胜男;刘金峰;杨世忠;周蕾 -专利权人：华东理工大学
申请日： 2020-04-23 - 公布日： 2023-02-10 - 主分类号： C12N1/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种筛选产生物表面活性剂兼性厌氧菌的方法，包括如下步骤：(1)采集油污染环境样品，并于4℃环境中保存；(2)取少量样品，加入到富集培养基中培养，所得培养液再接入新配置的富集培养基中培养，如此连续转接培养3次；(3)取第三次转接的富集培养液，涂布于LB平板培养，获得单菌落；(4)将单菌落接种到发酵培养基中培养，测定培养液表面张力，选取培养液表面张力低于30mN/m菌株；(5)将选取的菌株接种于原油平板上，培养，呈现明显排油圈的菌株即为产生物表面活性剂厌氧菌株。与现有技术相比，本发明的优点是能够快速、高效地筛选获得兼性厌氧产生物表面活性剂菌株。
一种筛选生物表面活性剂厌氧菌方法

[发明专利]一种木蝴蝶种子促铁内生真菌的分离方法及其应用-CN202211294267.7在审
发明人：孙正海;李丽萍;樊亮宇;刘佳;许娟娟;杨帆;李伟;李嘉辉;王坤;丁慕溪;李娇珍;房佳茹;周士家;徐慧婷;申宏权;门宇辰;姜姝君;蔡起航;易松恒;张峰睿;李宛玲;杨寅新;常婉琦 -专利权人：西南林业大学
申请日： 2022-10-21 - 公布日： 2023-01-24 - 主分类号： C12N1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种木蝴蝶种子促铁内生真菌的分离方法及其应用，其中分离方法主要包括：S1：种子预处理；S2：内生真菌分离；S3：菌株ITS序列鉴定；S4：菌株产铁载体活性测定；将分离得出的载铁能力最强的促铁内生真菌Penicilliumochrochloron接种至黄豆幼苗，经实验验证木蝴蝶种子中分离的促铁内生真菌对黄豆对铁的转运吸收具有明显的促进作用；对研究内生菌促进植物铁吸收研究具有重要的意义。
一种木蝴蝶种子促铁内生真菌分离方法及其应用

[发明专利]一种通过猝灭菌株抑制硫铁矿酸性废水产生的方法-CN202211350249.6在审
发明人：孙昕;冉秀丽 -专利权人：西安建筑科技大学
申请日： 2022-10-31 - 公布日： 2023-01-24 - 主分类号： C12N1/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种利用猝灭菌株抑制硫铁矿酸性废水产生的方法，主要是从河流湖库底泥中筛选出一种猝灭菌株，利用猝灭菌株降解氧化亚铁硫杆菌群体感应中的信号分子，削弱氧化亚铁硫杆菌群体感应水平，抑制氧化亚铁硫杆菌的生长，降低硫铁矿中三价铁的释放。具体是把预处理的底泥在最小培养基中进行富集培养，再在LB琼脂平板上分离培养得到纯菌落；然后对纯菌落进行琼脂覆盖试验，初步筛选出具有猝灭能力的细菌，再测试其对信号分子的降解能力和复筛，得到更优性能的猝灭菌株，并对复筛出的猝灭菌株扩大培养，将猝灭细菌制成菌悬液，以107～108CFU/g投加比例接种至硫铁矿土壤中，实现从源头上控制硫铁矿的金属污染。
一种通过灭菌抑制硫铁矿酸性废水产生方法

[发明专利]一种红托竹荪菌种快速分离培养基的制备方法及应用-CN202211309369.1在审
发明人：陈飞;王建民;池景良;苏明礼;韩冰;章瀚天;于广峰;冀宝营;陈顺 -专利权人：辽宁省微生物科学研究院;辽宁蘑磨达食用菌科技有限公司
申请日： 2022-10-25 - 公布日： 2023-01-10 - 主分类号： C12N1/02 文献下载
摘要：本发明涉及红托竹荪菌种生产培养技术领域，具体而言，涉及一种红托竹荪菌种的分离方法以及红托竹荪菌种的生产方法。本发明采用了特定的分离培养基，可以增加红托竹荪菌种基内菌丝直径，提高红托竹荪组织分离菌种过程菌丝萌发和生长速度，缩短分离时间、提高效率。还可以在培养过程中通过观察培养基上菌落的透明圈，确定菌种产酶情况，在保证菌种代谢酶系完整的同时，避免了菌种的老化，保证了菌种的质量，实现了菌种的快速分离，保证了后续的生产需求。
一种竹荪菌种快速分离培养基制备方法应用

[发明专利]一种筛选能够同时降解纤维素和无机磷的芽孢杆菌的方法-CN202211278192.3在审
发明人：郭卫华;尹美淇;崔兆杰;刘乐乐 -专利权人：山东大学
申请日： 2022-10-19 - 公布日： 2023-01-06 - 主分类号： C12N1/02 文献下载
摘要：本发明属于工业微生物技术领域，涉及芽孢杆菌的筛选方法。一种筛选能够同时降解纤维素和无机磷的芽孢杆菌的方法，包括：（1）将接种物添加到含有少量营养元素的无机盐培养基中，进行富集培养；（2）对富集培养后的菌液进行分离纯化，并挑选芽孢杆菌；（3）采用筛选培养基从芽孢杆菌中筛选同时具有解纤维素和解无机磷功能的菌株。本发明提供的方法，利用纤维素分解指数和有效磷含量来对菌株降解能力进行筛选，有效地筛选到了能同时高效降解纤维素和无机磷的菌株。
一种筛选能够同时降解纤维素无机芽孢杆菌方法

[发明专利]一种潮汐式产PHB甲烷氧化菌的富集方法-CN202211103548.X在审
发明人：徐恒;王佳惠;武振康 -专利权人：中国矿业大学（北京）
申请日： 2022-09-09 - 公布日： 2023-01-03 - 主分类号： C12N1/02 文献下载
摘要：一种潮汐式产PHB甲烷氧化菌的富集方法，包括挂膜阶段和目标菌筛选阶段。在挂膜阶段，将接种物、多孔填料和微生物营养液置于容器中，使多孔填料处于浸泡状态，向容器的气相空间通入CH4/O2混合气后进行恒温振荡培养，经过若干次用新的微生物营养液和CH4/O2混合气分别对容器中液体和气体进行置换后，完成填料挂膜。在目标菌筛选阶段，多孔填料交替处于沥干‑浸泡状态，沥干状态时，在过量的CH4/O2混合气和营养缺乏环境下静置培养，CH4和O2的气液传质速率得到提升，且目标菌开展PHB合成与积累，浸泡状态时，目标菌获得营养并利用PHB快速生长繁殖，从而实现富集。本发明能显著提升产PHB甲烷氧化菌生物量和活性。
一种潮汐 phb 甲烷氧化富集方法

[发明专利]土壤分离培育乳酸菌制作方法-CN202211329328.9在审
发明人：刘富金;王欢;周粉群;陈秀梅 -专利权人：贵州万益康微生物科技有限公司
申请日： 2022-10-27 - 公布日： 2022-12-23 - 主分类号： C12N1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种土壤分离培育乳酸菌制作方法，包括以下步骤：S1：在没有受过化肥农药及各种工业污染的深林土壤中，选择土壤深处10‑30公分含有乳白色的菌丝的位置作为投放采集乳酸菌培养基采集点。本发明通过从土壤中提取乳酸菌并应用到土壤中，有利于增加土壤微生物菌群数量，提高土壤活性，改良土壤，分解农残，分解土壤有机质，释放各种营养成份有利于植物吸收，通过土壤微生物不断增多，能抑制各种病原菌，减少农作物病虫害发生，从而减少农药使用量，提高农作物产量和品质，提高农产品经济效益。
土壤分离培育乳酸菌制作方法