[发明专利]菠萝蛋白酶成分

权利要求书

1.一种作为菠萝蛋白酶成分的蛋白，具有由SDS-PAGE测定的约22.2-25.08kDa的分子量，并具有等电点约3.8-4.79，且具有如下氨基末端序列：

Val Pro Gln Ser Ile Asp Trp Arg Asp Tyr Gly Ala Val Asn Glu Val Lys Asn

(SEQ ID NO：1)并且，另外还包含以下序列：

Gly Gly Trp Glu Phe Lys(SEQ ID NO：2)

Lys Ala Val Asn Gly(SEQ ID NO：3)

Tyr Trp Ile Val Arg(SEQ ID NO：4)

Asn Ser Trp Gly Ser Ser Trp Gly Glu Gly Gly Tyr Val Arg(SEQ ID NO：5)

Thr Ser Leu Asn His Ala Ile Thr Ile Ile Val Tyr(SEQ ID NO：6)

Leu Pro Glu Phe (Gln) Pro (Gln) Val Leu Asp-Ala-(SEQ ID NO：7)

Gly Val Ser Ser Ser Ser Gly Ala Cys Gly Ile Ala Met Ser Pro Leu-Thr-

(SEQ ID NO：8)

Gly Gly Val Phe Ser Gly Pro Ala Gly(SEQ ID NO：9)

Asn Asn Ala Tyr(SEQ ID NO：10)

Ser Ser Gly Thr Lys Tyr Trp-Val-(SEQ ID NO：11)；其中括号中的氨基酸表示对前面氨基酸的替换氨基酸，而“-”表示未鉴定的氨基酸。

2.一种作为菠萝蛋白酶成分的蛋白，具有由SDS-PAGE测定的约22.2-25.08kDa的分子量，并可通过下列方法得到：

i.将菠萝蛋白酶溶解于pH5.0的乙酸缓冲液中；

ii.通过在S-Sepharose上的快流高效液相层析，用300ml以上的溶于乙酸缓冲液中的0-0.8M氧化钠线性梯度洗脱来分离菠萝蛋白酶的成分；

iii.收集对应于从柱上下来的第二个尖峰的组分；并且

iv.通过阴离子层析和疏水相互作用层析从(iii)中收集的组分分离主要蛋白。

3.如权利要求1或权利要求2中所述的蛋白或水果菠萝蛋白酶，用于人或兽医药。

4.如权利要求1或权利要求2中所述的蛋白或水果菠萝蛋白酶，用于治疗或预防人或其它哺乳动物中的癌症。

5.如权利要求1或权利要求2中所述的蛋白或水果菠萝蛋白酶在制备用于治疗或预防癌症的制剂方面的用途。

6.如权利要求4中所述的蛋白或权利要求5中所述的用途，其中癌症是实体癌如卵巢瘤、结肠癌、乳腺癌、肺癌或黑色素瘤，非实体肿瘤，白血病或病毒诱导的肿瘤如肝细胞癌、非何杰金氏淋巴瘤、鼻咽癌、伯基特淋巴瘤、卡波西肉瘤、T细胞白血病或宫颈癌。

7.如权利要求1或权利要求2中所述的蛋白或水果菠萝蛋白酶，用作免疫刺激剂。

8.如权利要求1或权利要求2中所述的蛋白或水果菠萝蛋白酶在制备免疫刺激剂方面的用途。

9.如权利要求7中所述的蛋白或如权利要求8中所述的用途，其中免疫刺激剂用于治疗由营养不良、感染(例如HIV和疟疾)、肿瘤(例如淋巴瘤、骨髓瘤及其它)、创伤(例如灼伤、击伤和手术)、医学治疗(例如用药如类固醇、环孢菌素和环磷酰胺)、蛋白丢失(如腹泻和灼伤)、遗传异常(如在缺乏T和/或B细胞的复合免疫缺陷病人中发现的)糖尿病和老龄引起的次级免疫缺陷。

10.如权利要求7中所述的蛋白或如权利要求8所述的用途，其中免疫刺激剂是疫苗佐剂。

11.如权利要求1或权利要求2中所述的蛋白或水果菠萝蛋白酶，用于治疗或预防对增加的NO合成应答的疾病或病症。

12.如权利要求1或权利要求2中所述的蛋白或水果菠萝蛋白酶在制备用于治疗或预防对增加的NO合成应答的疾病或病症的制剂方面的用途。