[发明专利]用哌嗪环氧乙烷衍生物诱导肿瘤细胞死亡的方法

说明书

                         背景发明领域：

本发明是关于用哌嗪衍生物诱导肿瘤细胞死亡，以及加强化疗治疗肿瘤细胞效果的方法，并且，特别是关于激活肿瘤细胞的渐进性细胞死亡以及逆转肿瘤细胞中多药物抗性的一种方法。本发明还涉及哌嗪衍生物在药物制备中的应用。    技术背景：

已经知道，某些环氧化物可在包括癌症治疗的多种医药领域中，作为药理活性化合物。已经合成了许多种环氧化物，用于各种目的。例如，Masaki等的(美国专利)Nos.4,507,297和4,596,803公开了几个以用于抑制心肌梗塞为目的的，具有环氧化物基团的哌嗪衍生物，包括NCO-700。Omura等的美国专利No.5,336,783公开了一种含有氨基甲酰基的吡咯衍生物，它具有Calpain(钙激活的中性蛋白蛋白酶)抑制活性。Yaginuma等的美国专利No.4,732,910公开了一种含有胍基和苄基的环氧化物，它对硫醇蛋白酶具有很强的酶抑制活性。Tamai等在美国专利Nos.4,333,879和4,382,889中公开了一种具有硫醇蛋白酶抑制活性，特别是具有钙-激活的中性蛋白酶(CANP)抑制活性的化合物EST。Tamai等又在美国专利4,418,075和4,474,800中公开了几种具有类似于EST化学结构的化合物，但是它们比EST多包含有一个亚氨基。

上述化合物都具有硫醇蛋白酶抑制活性，特别是对CANP(也可称为Calpain)具有抑制活性。但是，没有报导上述化合物中的任何一个在直接治疗癌细胞中是有效的，尽管Calpain抑制剂对人具有某些药物作用。

已经公布了具有不同效用的其它一些Calpain抑制剂。例如，Malfroy-Camine等在美国专利No.5,403,834中公布了具有强抗氧化剂性能和/或自由基清除性能的Salen-转换金属络合物。据说这些化合物能防止或减少对危象组织如心肌和中枢神经系统的局部缺血性损伤/再灌注性损伤。Nixon等在美国专利No.5,328,922中公布了二个相关的内源性神经，特别是人脑，钙-激活中性蛋白酶(CANP或calpain)抑制剂，被称为高分子量Calpastatin(HMWC)和低分子量Calpastatin(LMWC)。Kozarich等在美国专利No.5,268,164中公布了几个具有核心氨基酸序列或氨基类似序列的肽(促通透剂A-7)，它们可增加动物血-脑屏障的通透性。Ando等在美国专利Nos.5,424,325,5,422,359,5,416,117,5,395,958,和5,340,909中公布几个氨基酮衍生物(′325中),α-氨基酮衍生物(′359中),以及环丙烯酮衍生物(′117,′958和′909中),它们是对硫醇蛋白酶如Celpain的可逆性抑制剂。据说这些化合物在组织分布，细胞膜通透性，以及口服给药吸收等方面具有极好的性能。没有谈到关于这些化合物对癌细胞的治疗作用。

国际专利申请公报No.WO 94/00095公布了使用各种Calpain抑制剂，以便使细胞周期同步化。同步化作用被公布能缩短对癌症化疗的时间，并且能增加化学治疗剂的活性。其原理是，使所有的细胞同步化在S期，将使它们变得对化学治疗剂更敏感。此参考资料指出，在将Calpain抑制剂用于治疗癌症中，Calpain抑制剂必须在用主要化学治疗剂治疗之前使用。除此之外，没有任何关于治疗具有多药物抗性癌细胞的公开内容或提示。并且，决没有任何关于单独给予Calpain抑制剂诱导癌细胞死亡的公开内容或提示，也就是说，没有公布Calpain抑制剂具有有效的作用，除非在使用主要化学治疗剂治疗癌症之前，先以它们给药。

Shoji-Kasai等在Proc.Natl.Acad.Sci.USA 85:146-150(1988)中显示，培养在化学成分限定培养基中的表皮样癌A431细胞，可被E-64-d停滞在有丝分裂后期，E-64-d是硫醇蛋白酶-特异性抑制剂E-64的一种膜通透性衍生物。这些资料表明，CANP抑制剂对延缓某些癌的生长似乎有显著的作用。但是，当癌细胞具有多药物抗性时，这些作用将不能显示出，并且也不能导致癌细胞死亡。