[发明专利]用于增加造血细胞的方法

说明书

发明背景

造血是血细胞由骨髓中的多能干细胞发育和分化的过程。该过程包括通过靶细胞上的膜结合受体发挥作用的多肽生长因子(细胞因子)间的复杂的相互作用。对一特定的通常是系特异性和/或阶段特异性细胞因子的反应，细胞因子的作用导致细胞的增殖和分化。由干细胞向一单一细胞类型如血小板的发育可能需要许多以适宜的顺序发挥作用的细胞因子的协调作用。

多年来推测血小板的产生可能由特定的体液因子调节。早期的实验已经表明血小板减少的动物的血浆和尿液含有一种促进巨核细胞集落形成和增大骨髓巨核细胞的活性。在文献中这种活性被称为血小板生成素(最近由McDonald，《实验血液学》(Exp.Hematol.)16：201-205，1988和McDonald，《美国儿科血液学和肿瘤学杂志》(Am.J.Ped.Hematol.Oncol.)14：8-21，1992综述)。该活性的低浓度以及缺乏适宜的生物检测方法长期妨碍着蛋白质的纯化和鉴定。目前已经利用培养的基因工程细胞制备出血小板生成素。见de Sauvage等，《自然》(Nature)369：533-538，1994；Lok等，《自然》369：565-568，1994；Kaushansky等，《自然》369：568-571，1994；和Bartley等，《细胞》(Cell)77：1117-1124，1994。

已表明血小板生成素在正常的(Lok等，同上)和血小板减少的(Sprugel等，《血液》(Blood)84(10增刊1)：242a，1994)动物体内增加血小板的数量并且刺激红细胞的产生(Kaushansky等，《临床研究杂志》(J.Clin.Invest.)待发表)。在体外TPO促进定向成为巨核细胞的CD34⁺细胞的存活和增殖(Papayannopoulou等，《血液》84(10增刊1)：324a，1994)。

虽然目前TPO的克隆和鉴定允许研究其在刺激血小板生成中的临床应用，但血小板减少和贫血仍是重要的临床问题，如与癌症患者的化疗和放疗相关联。在接受骨髓移植和外周血干细胞移植，包括自体移植的患者中仍特别需要刺激血小板产生的方法。且还需要刺激红细胞产生。本发明提供满足这些需要的治疗方法并提供其它相关的的优点。

发明的总结

本发明提供用于在一需要增加造血细胞的受体患者体内增加造血细胞的方法。这些方法包括步骤(a)给予供体一定数量的足以刺激供体体内髓系细胞增殖的血小板生成素(TPO)；(b)从供体收集细胞，其中细胞为骨髓细胞或外周血干细胞；并(c)将骨髓细胞或外周血干细胞输注给受体患者。供体和受体可以是不同个体或同一个体。在本发明的一个实施方案中，受体患者已进行过化疗或放疗处理。在另一实施方案中，给予骨髓细胞或外周血干细胞后或同时，给予受体患者一定量的足以促进血小板恢复或红细胞恢复的TPO。

在另一方面，本发明提供制备用于移植的细胞的方法，包括给予供体一定数量的足以刺激供体体内髓系细胞增殖的TPO，和从供体收集细胞，其中细胞为骨髓细胞或外周血干细胞。

在第三方面，本发明提供一种在一接受化疗或放疗的患者体内刺激血小板恢复或红细胞恢复的方法，包括(a)给予患者一定数量的足以刺激患者体内髓系细胞增殖的TPO；(b)在化疗或放疗前从患者体内收集骨髓细胞或外周血干细胞；并(c)在化疗或放疗后给患者回输所收集的细胞。在一个实施方案中本方法进一步包括在回输所收集的细胞后或同时给予患者一定量的足以促进血小板恢复或红细胞恢复的TPO。

参考下面详细的描述和所附的图，本发明的这些和其它方面将更为明显。

图的简要描述

图1说明移植来自TPO或载体处理的供体小鼠的骨髓细胞对受体动物的血小板记数的效果。在一个实验中，对TPO处理的骨髓的受体也用TPO(20kU/天腹腔注射)处理。数据表示为在两个实验中的10-20只小鼠的均值。*，p＜0.05；**，p＜0.01。

图2说明移植来自TPO或载体处理的供体小鼠的骨髓细胞对受体动物的红细胞记数的效果。数据表示为在两个实验中的20只小鼠的均值。*，p＜0.05；**，p＜0.005。

图3说明在接受来自TPO或载体处理的供体的骨髓移植物的小鼠中经过或不经过移植后TPO处理血小板的恢复。

发明的详细描述

术语“干细胞”此中被用于表示多能干细胞和髓样祖细胞。