[发明专利]Ｄ－α氨基酸的制备方法

权利要求书

1.D-α-氨基酸的制备方法，其特征在于，在酶的作用下，使D-N-氨基甲酰-α-氨基酸在水性介质中转化成对应的D-α-氨基酸，然后收集生成的D-α-氨基酸，所述酶是用下述方法获得的：用含有载体DNA和一段DNA片段的重组DNA转化属于埃希氏杆菌属微生物的宿主菌体细胞，培养所得到的转化体，所述DNA片段具有编码序列表序列编号1的氨基酸编号1至303的氨基酸序列的基因，或序列表序列编号2的氨基酸编号1至311的氨基酸序列的基因。

2.权利要求1记载的制备方法，其中所述DNA片段具有序列表序列编号1的碱基编号1-1785的碱基序列，或者与其等价的碱基序列，或具有序列表序列编号2的碱基编号1-1820的碱基序列，或者与其等价的碱基序列。

3.权利要求1或2记载的制备方法，其中D-N-氨基甲酰-α-氨基酸是一种用通式

R-CH(NHCONH₂)-COOH

(式中R表示苯基、用羟基取代的苯基、烷基、取代烷基、芳烷基或噻吩基)表示的化合物。

4.权利要求1或2记载的制备方法，其中转化体产生的酶，被用作该转化体、菌体、菌体处理物、从菌体提取的提取物、固定化菌体或固定化酶的培养液。

5.权利要求2记载的制备方法，其中所述具有序列编号1的碱基序列的DNA片段来源于土壤杆菌属细菌。

6.权利要求2记载的制备方法，该所述具有序列编号2的碱基序列的DNA片段来源于假单胞菌属细菌。

7.权利要求6记载的制备方法，其中所述细菌是假单胞菌KNK 003A(FERM BP3181)。

8.权利要求5记载的制备方法，其中所述细菌是土壤杆菌KNK 712(FERM BP1900)。

9.权利要求1或2记载的制备方法，其中所述载体质粒是pUC18或pUC19。

10.权利要求1或2记载的制备方法，其中所述重组质粒是pAD101、pAD108、pPHD301或pPHD304。

11.权利要求1或2记载的制备方法，其中所述的转化体是大肠杆菌JM 109 pAHD 101、大肠杆菌JM 109 pAD 108(CCTCC M91095)、大肠杆菌JM109 pPHD 301或大肠杆菌JM 109 pPD 304(CCTCC M91096)。

12.D-N-氨基甲酰-α-氨基酸酰胺水解酶的制备方法，其特征在于，用含有载体DNA和一段DNA片段的重组DNA转化属于埃希氏杆菌属微生物的宿主菌体细胞，培养所得到的转化体，所述DNA片段具有编码序列表序列编号1的氨基酸编号1至303的氨基酸序列的基因，或序列表序列编号2的氨基酸编号1至311的氨基酸序列的基因。

13.权利要求12记载的制备方法，其中所述DNA片段具有序列表序列编号1的碱基编号1-1785的碱基序列，或者与其等价的碱基序列，或具有序列表序列编号2的碱基编号1-1820的碱基序列，或者与其等价的碱基序列。