[发明专利]玉米品种、纯度鉴定方法无效
| 申请号: | 89108837.7 | 申请日: | 1989-12-01 |
| 公开(公告)号: | CN1014638B | 公开(公告)日: | 1991-11-06 |
| 发明(设计)人: | 王健;王春;卞科;周展明;才秉浩;田利民;周燕琴;宋新敏 | 申请(专利权)人: | 河南省科学器材公司 |
| 主分类号: | G01N27/447 | 分类号: | G01N27/447 |
| 代理公司: | 农牧渔业部专利事务所 | 代理人: | 李光松 |
| 地址: | 450003*** | 国省代码: | 河南;41 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 玉米 品种 纯度 鉴定 方法 | ||
1、一种鉴定玉米品种及其纯度的方法,采用通用型电泳仪、垂直板电泳槽和不连续聚丙烯酰胺凝胶系统,其特征在于包括以下步骤:
A、用提取液提取玉米种子总蛋白,离心后,取上清液直接电泳;
B、以FeSO4-Vc-H2O2作催化系统,利用酸性不连续聚丙烯酰胺凝胶系统制备电泳胶;
C、电泳完毕将胶取出,放入染色液中染色,得该玉米种子蛋白谱带;
D、比照各种玉米品种标准蛋白谱带,鉴定种子品种;
E、观察样品蛋白谱带,计算出相同谱带样品占参试样品的百分比,求出纯度。
2、根据权利要求1所述的方法,其特征在于种子代谢蛋白提取所用的提取液配方是:0-4M氯化钠溶液,其中含有15-25%蔗糖和0.001-0.003%甲基绿。
3、根据权利要求1所述的方法,其特征在于代谢蛋白提取时,玉米样品量∶提取液量=1∶1-4,室温下提取0.5-4小时,间歇振荡2-6次后,在3000-6000rpm离心5-20分钟,取上清液。
4、根据权利要求1所述的方法,其特征在于电泳中的凝胶系统采用酸性条件下的不连续聚丙烯酰胺系统,配方如下表:
5、根据权利要求1所述的方法,其特征在于电泳缓冲液采用甘氨酸/乳酸系统,pH3.2-4.0。
6、根据权利要求1所述的方法,其特征在于凝胶染色的配方为:8-12%三氯乙酸,其中含0.02-0.04%考马斯亮蓝R250,染色1-4小时,不需脱色。
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