[其他]抗凝血剂肽

说明书

本申请是1987年1月23日递交的006417号申请的后续部分。本发明涉及用作抗凝血剂的新的肽类。

抗凝血剂是治疗急性深部静脉血栓形成、肺栓塞、肢体的急性动脉栓塞形成、心肌梗塞和播散性血管内凝血的有用药剂。据信服用预防剂量的抗凝血剂可预防风湿性和动脉硬化性心脏病患者血管栓塞再发，并可预防外科的某些血栓栓塞性并发症。给予抗凝血剂亦可用于治疗冠状动脉和脑血管病。动脉血栓形成，特别是心肌和脑动脉的血栓形成是死亡的最重要的原因。

水蛭素是从水蛭腺中分离的有65个残基的多肽。其为一种抗凝血剂，一种凝血酶的特异性抑制剂。虽然水蛭素的效力相当强，但因为其量很有限、价格昂贵并且通常会引起象给予任何这种大小的外源蛋白一样的变态反应，所以似乎不可能将由水蛭提取物中分离的水蛭素用于临床。

申请人发现，水蛭素的一个特定区域，至少部分地与其抗凝血活性有关。已化学合成了这一区域，而且其某些类似物似乎可与凝血酶的识别位点结合，但不与酶的切割位点结合，这两个位点在空间上是分开的。合成的肽的结合可竞争性地阻止血纤维蛋白原与凝血酶的识别位点的结合，而这是血纤维蛋白产生和血凝块形成的先决条件。本发明的肽具有显著的抗凝血剂活性，并且它们的只与凝血酶的识别位点结合而不与其酶切位点结合的不寻常的能力使得人们考虑到抗凝血剂治疗在科学研究上的意义和治疗上的重要性。

结构通式为

X-A₁-A₂-A₃-A₄-A₅-A₆-A₇-A₈-A₉-A₁₀-Y

其中X是选自氢、一或两个有1至6个碳原子的烷基、一或两个有2至10个碳原子的酰基，苄氧羰基或叔丁氧基羰基的氨基末端残基;

A₁是一个键或含有1至5个任何氨基酸残基的肽段;

A₂是Phe、Sub Phe、β-（2-和3-噻吩基）丙氨酸、β-（2-和3-呋喃基）丙氨酸、β-（2-，3-和4-吡啶基）丙氨酸、β-（苯并噻吩-2-和3-基）丙氨酸、β-（1-和2-萘基）丙氨酸、Tyr或Trp;

A₃是Glu或Asp;

A₄是任何氨基酸;

A₅是Ile、Val、Leu、Nle或Phe;

A₆是Pro、Hyp、3，4-脱氢Pro、噻唑烷-4-羧酸酯、Sar、NMe Pgl或D-Ala;

A₇是任何氨基酸;

A₈是任何氨基酸;

A₉是选自Tyr、Tyr（SO₃H）、Trp、Phe、Leu、Nle、Ile、Val、Cha和Pro的亲脂性氨基酸或至少包含上述这些亲脂氨基酸之一的二肽;

A₁₀是一个键或含1至5个任何氨基酸残基的肽片段;且

Y是选自OH、C₁-C₆烷氧基、氨基、一或二-（C₁-C₄）烷基取代的氨基，或苄氨基的羧基末端残基;

的肽衍生物为有用的抗凝血剂。

下面列出本说明书中所用的氨基酸的缩写符号：

Gly-甘氨酸

Ala-丙氨酸

Val-缬氨酸

Leu-亮氨酸

Ile-异亮氨酸

Pro-脯氨酸

Phe-苯丙氨酸

Trp-色氨酸

Met-蛋氨酸

Ser-丝氨酸

Thr-苏氨酸

Cys-半胱氨酸

Tyr-酪氨酸

Asn-天冬酰胺

Gln-谷氨酰胺

Asp-天冬氨酸

Glu-谷氨酸

Lys-赖氨酸

Arg-精氨酸

His-组氨酸

Nle-正亮氨酸

Hyp-羟脯氨酸

Cha-环己基丙氨酸

Orn-鸟氨酸

Glt-戊二酰基

Mal-马来酰基

Npa-β-（2-萘基）丙氨酸

3，4-脱氢Pro-3，4-氢脯氨酸

Tyr（SO₃H）-酪氨酸硫酸酯

Pgl-苯甘氨酸