[其他]用“高聚物、盐、水”两相系统纯化酶制剂无效
| 申请号: | 86103207 | 申请日: | 1986-05-05 |
| 公开(公告)号: | CN86103207A | 公开(公告)日: | 1987-11-18 |
| 发明(设计)人: | 林哲甫;张维钦;李玉玲 | 申请(专利权)人: | 中山大学 |
| 主分类号: | C12N9/28 | 分类号: | C12N9/28 |
| 代理公司: | 中山大学专利事务所 | 代理人: | 叶贤京,林灿志 |
| 地址: | 广东省广州*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 高聚物 两相系统 纯化 酶制剂 | ||
1、一种酶制剂的提纯方法,其特征是采用“高聚物、盐、水”所构成的两相系统对酶制剂进行分离提纯。
2、根据权利要求1所述的酶制剂提纯方法,其特征是可采用“聚乙二醇、盐、水”两相系统对枯草杆菌α-淀粉酶制剂进行分离提纯。
3、一种如权利要求1、2所述的酶制剂提纯方法,其特征是采用如下具体做法:
a.取50%的聚乙二醇溶液(每一百克溶液含聚乙二醇50克,以下同)10~30克,(终浓度为10~30%),置于分液漏斗中,加入50%硫酸铵(NH4)2SO4溶液(每一百毫升溶液含硫酸铵50克,以下同)10~20毫升,(终浓度为10~20%)、12.5%枯草杆菌α-淀粉粗酶液(每一百毫升溶液含酶制品12.5克,下同)16.0毫升,(以上重量、体积均可按比例放大、缩小)充分摇荡均匀,静置分层;
b.从分液漏斗放出下层相,上层相仍留在分液漏斗中,另外加入25%磷酸盐缓冲液(每一百毫升溶液含磷酸盐25克)20~40毫升,蒸馏水25毫升,(以上重量体积均可按比例放大缩小),充分荡匀,静置分层;
c.分出下层相得α-淀粉酶精制品溶液,透析除盐冻干即得成品。
4、根据权利要求3所述的酶制剂提纯方法,其特征是最佳做法如下:
a.取50%的聚乙二醇溶液20.5克,(终浓度为20.5%),置于分液漏斗中,再加入50%硫酸铵(NH4)2SO4溶液13.7毫升,(终浓度13.7%),12.5%枯草杆菌α-淀粉粗酶液16毫升,(以上重量体积均可按比例放大缩小),充分摇荡均匀,静置分层;
b.从分液漏斗放出下层相,上层仍留在分液漏斗中,另外加入25%磷酸盐缓冲液35毫升,蒸馏水25毫升,(以上重量体积均可按比例放大缩小),充分摇匀,静置分层;
c.分出下层得α-淀粉酶精制品溶液,透析除盐,冻干即得成品。
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