[发明专利]一种黄酮衍生物类氨肽酶N抑制剂及其制备方法和应用

说明书

本发明属于有机化合物合成与医药应用技术领域，具体涉及一种黄酮衍生物类氨肽酶N抑制剂及其制备方法和应用。本发明所述黄酮衍生物类氨肽酶N抑制剂具有式(I)所示的结构：式(I)。体外抑制氨肽酶N活性试验显示，部分黄酮衍生物类氨肽酶N抑制剂的抑酶活性与阳性药乌苯美司相比，提高了一至两个数量级；个别黄酮衍生物类氨肽酶N抑制剂的抑酶活性达到了纳摩尔水平，解决了非肽类氨肽酶N抑制剂活性较差，结构单一的问题，丰富了氨肽酶N抑制剂的结构多样性。

技术领域

本发明属于有机化合物合成与医药应用技术领域，具体涉及一种黄酮衍生物类氨肽酶N抑制剂及其制备方法和应用。

背景技术

氨肽酶N（APN，CD13，EC 3.4.11.2）是锌离子依赖的II型跨膜蛋白，属于金属蛋白酶家族，以同源二聚体的形式锚定于细胞膜表面，呈“海马”形。其催化结构域位于细胞外，可以水解底物N端的碱性或者中性氨基酸，参与多肽类底物的降解。氨肽酶N的催化活性中心含有1个锌离子和S₁、S₁’、S₂’三个疏水口袋。锌离子结合底物中的锌离子螯合基团，三个疏水口袋分别结合底物的P₁、P₁’和P₂’位点。研究证明，氨肽酶N在肿瘤形成、侵袭转移及肿瘤血管生成中发挥着重要的作用。

氨肽酶N具有以下作用：（1）氨肽酶N参与肿瘤转移。起屏障作用的细胞外基质主要成分为胶原蛋白、纤维黏连蛋白、层黏连蛋白等，这些成分交联成网状结构，支撑组织结构，对细胞间的稳定性和信号传导起着重要作用。肿瘤细胞表面的氨肽酶N可以水解胶原蛋白家族的IV型胶原蛋白，使肿瘤细胞突破基底膜屏障，进入血管或者淋巴管，发生转移。（2）氨肽酶N与肿瘤新生血管生成有关。肿瘤组织中的血管与正常组织相比，更加丰富和不规则。正常的内皮细胞表面不表达氨肽酶N，处于血管新生阶段的内皮细胞表面有氨肽酶N的高表达，参与内皮细胞形态发生过程。氨肽酶N抑制剂不影响内皮细胞增殖，但可以抑制形态发生过程中的管状结构形成。（3）氨肽酶N是肝癌干细胞的表面标志物之一（J Clin Invest2010,120(9),3326-3339）。肿瘤干细胞的存在是肿瘤耐药、复发和转移的重要原因。研究表明氨肽酶N抑制剂与氟尿嘧啶等细胞毒类抗肿瘤药物合用，具有协同抗肿瘤效果。氨肽酶N抑制剂通过抑制肝癌干细胞，有望可以解决肝癌耐药、复发和转移的问题。

氨肽酶N抑制剂根据结构分类，分为类肽类抑制剂和非类肽类抑制剂。乌苯美司是20世纪八十年代上市药物，是类肽类氨肽酶N抑制剂，具有类二肽结构，作为免疫增强剂用于白血病的辅助治疗。此外，报道的天然类肽类氨肽酶N抑制剂还有amastatin（CAS号67655-94-1）、probestin（CAS号123652-87-9）、phebestin（CAS号187402-73-9）等。体内有多种氨肽酶、羧基肽酶和二肽基肽酶的存在，类肽类抑制剂选择性较差。这些类肽类抑制剂具有多个手性中心，合成过程中控制手性难度较大，全合成成本较高。因此，开发非肽类易合成的氨肽酶N抑制剂具有较大的意义。目前，非肽类氨肽酶N抑制剂也存在活性较差，结构单一等问题。黄酮类化合物广泛存在于中药中，是中药发挥药效的物质基础之一，如白杨素、槲皮素等均为黄酮类化合物。黄酮类化合物具有相对广泛的药理作用，毒性小，合成难度小，适合作为药物的结构片段。因此，开发黄酮类氨肽酶N抑制剂具有较好的科研价值。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种黄酮衍生物类氨肽酶N抑制剂及其制备方法和应用。

为达此目的，本发明采用以下技术方案：

第一方面，一种黄酮衍生物类氨肽酶N抑制剂，具有式(I)所示的结构：

式(I)；

其中：

R₁是、、、、、、、、、、、、、、、、、、、或；

R₂是H、甲氧基、、、或。