[发明专利]含有ATG7 siRNA的外泌体及其应用在审
申请号: | 202310684401.2 | 申请日: | 2023-06-12 |
公开(公告)号: | CN116656733A | 公开(公告)日: | 2023-08-29 |
发明(设计)人: | 李伟;梁展文;陈凯;龚斐然;何康;徐梦丹;吴梦瑶;徐彩华 | 申请(专利权)人: | 苏州大学附属第一医院 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N15/87;C12N5/10;C12N15/62;C12N15/113 |
代理公司: | 南通毅帆知识产权代理事务所(普通合伙) 32386 | 代理人: | 张修彦 |
地址: | 215006 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 含有 atg7 sirna 外泌体 及其 应用 | ||
1.一种用于胆道癌治疗的工程化外泌体的制备方法,其特征在于,包括:
S1:提取表达重组蛋白CD63-APO-A1的靶向性外泌体;
S2:将ATG7 siRNA装载入S1中的靶向性外泌体得到用于胆道癌治疗的工程化外泌体。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在S2中,所述ATG7 siRNA的核苷酸序列为SEQ ID NO:5-9中的至少一种。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述S1包括:
S11:制备CD63-APO-A1融合蛋白;
S12:构建表达载体pLentai-PuroR-CMV-CD63-APO-A1-EGFR;
S13:提取重组质粒pLentai-PuroR-CMV-CD63-APO-A1-EGFR;
S14:转染重组质粒pLentai-PuroR-CMV-CD63-APO-A1-EGFR到细胞中,提取表达重组蛋白CD63- CXCL17的靶向性外泌体。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,在S12中,将pLentai-PuroR-CMV-EGFRVector与CD63-APO-A1回收产物连接,接着将连接产物转染大肠杆菌。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,CD63-APO-A1融合基因的核苷酸序列如SEQID NO:14所示,所述CD63-APO-A1融合基因翻译成所述CD63-APO-A1融合蛋白。
6.一种用于胆道癌治疗的工程化外泌体,其特征在于,所述工程化外泌体含有ATG7siRNA。
7.根据权利要求6所述的工程化外泌体,其特征在于,所述工程化外泌体包膜上表达重组CD63-APO-A1融合蛋白。
8.根据权利要求1-5所述方法制备得到的工程化外泌体或权利要求6-7所述的工程化外泌体在制备用于胆道癌治疗的药物中的应用。
9.一种治疗胆道癌的药物,其特征在于,所述药物包括权利要求6-7所述的工程化外泌体或权利要求1-5所述的方法制备得到的工程化外泌体。
10.根据权利要求9所述的治疗胆道癌在癌症治疗领域中的应用。
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