[发明专利]一种乳酸片球菌及其应用

说明书

本发明公开了一种乳酸片球菌及其应用，为乳酸片球菌CICC20720，其16S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示，通过形态、生理生化、16S rDNA序列分析及系统发育树构建进行鉴定，并对其耐人工胃液、肠液性能进行研究。本发明还公开了乳酸片球菌CICC20720在枸杞发酵中的应用。本发明采用上述的一种乳酸片球菌CICC20720，能够解决现有枸杞汁发酵过程中，枸杞汁的药味浓重和口感不佳的问题，为发酵枸杞汁的工业化生产和新发酵剂的制备提供了安全、有益且发酵性能优良的乳酸片球菌。

技术领域

本发明涉及微生物发酵技术领域，尤其是涉及一种乳酸片球菌及其应用。

背景技术

枸杞中含有多种活性成分。其中枸杞多糖是最丰富的活性成分，具有丰富的药理活性和保健活性。如降血糖、抗氧化、增强免疫力等作用，枸杞中的有效成分可以改善肠道微生物群的组成和丰度，而枸杞对肠道微生物组、微生物代谢产物及其相互作用的影响的研究仍然非常有限。

乳酸菌(lactic acid bacteria，LAB)是一类对宿主有益的活性微生物，进入并定植在胃肠道后，能够与宿主共生，从而构成一个复杂的微生态环境。乳酸菌不仅可以调节人体代谢平衡，还是发酵产品中的主要微生物，其在发酸过程中，不仅可以改善食品本身带有的气味及产品特性，还可以提高产品营养价值。此外，乳酸菌在发酵过程中，产生大量的蛋白酶及各种微量的脂肪酶，可将食品中的大分子物质蛋白质和脂肪降解为更易被人体吸收的小分子氨基酸及脂肪酸等。其自身不仅可以合成维生素B1、B2、B3、B5等，还可以产生某些游离氨基酸或氨基酸衍生物，抑制丙烯疏胺的合成。乳酸菌在食品行业应用广泛，常被用来发酵酸奶及其他乳制品、蔬菜以及肉制品等。由于枸杞自身并没有突出的香味，并且药味浓重，使用商业乳酸菌发酵剂发酵的枸杞汁风味和口感不佳，影响了乳酸菌发酵枸杞汁饮品的生产和市场开发。因此，开发新的发酵剂来改善枸杞汁的药味浓重和口感不佳具有重要意义。

本发明中的一种乳酸片球菌CICC20720可以显著改善发酵枸杞汁的品质和风味，为发酵枸杞汁的工业化生产和新发酵剂的制备提供参考依据。

发明内容

本发明的目的是提供上述的一种乳酸片球菌CICC20720，能够解决现有枸杞汁发酵过程中，枸杞汁的药味浓重和口感不佳的问题，为发酵枸杞汁的工业化生产和新发酵剂的制备提供了安全、有益且发酵性能优良的乳酸片球菌。

为实现上述目的，本发明提供了一种乳酸片球菌CICC20720，其16S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示。

上述的一种乳酸片球菌CICC20720，采用16S rDNA基因进行分子生物学鉴定，以乳酸片球菌CICC20720的基因组为模板进行PCR扩增；正向引物为：5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3'，如SEQ ID NO.2所示，反向引物为：5'-GGTTACCTTGTTACGACTT-3'，如SEQ ID NO.3所示。

优选的，PCR扩增体系为(20μL)：模板DNA 2μL，KOD酶(5U/μL)0.4μL，10×KODbuffer 2μL，2mM dNTPs 2μL，正向引物和反向引物1.2μL，MgSO₄1.2μL，ddH₂O 11.2μL；PCR扩增参数设置为：94℃预变性2min，98℃变性10s，55℃退火30s，68℃延伸。

本发明还提供了一种乳酸片球菌在枸杞汁发酵中的应用。

本发明还提供了一种乳酸片球菌在改善发酵枸杞汁的药味浓重和口感不佳中的应用。

上述的应用，包括以下步骤：

将枸杞和水以1：10的比例混合浸泡5-6h，加入0.15％(w/v)的果胶酶进行打浆，然后进行过滤除籽，并用柠檬酸将枸杞汁的pH调至4.5左右，混匀后进行65℃，30min水浴巴氏杀菌，冷却至室温后将培养好的乳酸片球菌菌悬液按5％的接种量接入枸杞汁中，轻轻摇晃，放入37℃培养箱中培养48h。