[发明专利]一种基于生物传感器的快速检测沙门氏菌的方法在审
申请号: | 202310619455.0 | 申请日: | 2023-05-30 |
公开(公告)号: | CN116482360A | 公开(公告)日: | 2023-07-25 |
发明(设计)人: | 褚海培;陈瑞爱;冼美添;徐飞;李佳慧;韩银;冯海霞;陈思璇 | 申请(专利权)人: | 华南农业大学 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;G01N33/58;G01N33/543;G01N21/64 |
代理公司: | 丽水创智果专利代理事务所(普通合伙) 33278 | 代理人: | 杨文 |
地址: | 510642 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 生物 传感器 快速 检测 沙门氏菌 方法 | ||
1.一种基于生物传感器的快速检测沙门氏菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将待检测牛奶高速离心后,去除上层脂肪和下层沉淀,并调节牛奶的pH值,将处理后的牛奶作为待检测样品;
(2)将生物传感器与待检测样品进行混合,捕获待检测样品中可能存在的沙门氏菌;
(3)将步骤(2)中可能捕获了沙门氏菌的生物传感器与液体培养基混合,并将得到的混合物置于能使沙门氏菌增殖的条件下进行培养;
(4)将步骤(3)得到的培养物吸入无菌注射器中,利用超滤膜过滤后,利用PBS进行多次洗涤,洗涤后的剩余物在355纳米紫外灯照射下观察是否有荧光,有荧光则说明有沙门氏菌,没有荧光则没有沙门氏菌。
2.根据权利要求1所述的基于生物传感器的快速检测沙门氏菌的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述高速离心的转速为12500-13000r/min,所述高速离心的时间为10-12min;所述去除上层脂肪和下层沉淀的步骤中,采用超滤膜,所述超滤膜的膜孔径为0.25-0.3μm。
3.根据权利要求1所述的基于生物传感器的快速检测沙门氏菌的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述调节牛奶的pH值的步骤中,采用Tris-HCl溶液,调节pH值为7.7。
4.根据权利要求1所述的基于生物传感器的快速检测沙门氏菌的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述生物传感器为免疫磁珠,所述免疫磁珠由谷胱甘肽修饰的CdTe量子点、沙门氏菌抗体与磁珠偶联而成。
5.根据权利要求4所述的基于生物传感器的快速检测沙门氏菌的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述混合的温度为35-38℃,所述混合的时间为25-35min。
6.根据权利要求1所述的基于生物传感器的快速检测沙门氏菌的方法,其特征在于,步骤(3)中,所述增殖的条件为温度32-37℃、pH为7-7.5。
7.根据权利要求1所述的基于生物传感器的快速检测沙门氏菌的方法,其特征在于,步骤(4)中,所述利用PBS进行多次洗涤,具体包括以下步骤:另取注射器,吸入浓度为5-6g/L、pH=7.5的PBS溶液洗涤3-5次,再用含有吐温-20的浓度为5-6g/L、pH=7.5的PBS溶液洗涤3-5次,所述吐温-20的体积百分比为0.05%。
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