[发明专利]一种检测曼氏血吸虫的LAMP引物组及其应用在审
| 申请号: | 202310599749.1 | 申请日: | 2023-05-24 |
| 公开(公告)号: | CN116622857A | 公开(公告)日: | 2023-08-22 |
| 发明(设计)人: | 吴忠道;胡云逸;沈佳;孙希 | 申请(专利权)人: | 中山大学 |
| 主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/6844;C12N15/11 |
| 代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 段卉 |
| 地址: | 510275 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 检测 血吸虫 lamp 引物 及其 应用 | ||
1.一种用于检测曼氏血吸虫的LAMP引物组,其特征在于,所述LAMP引物组为核苷酸序列如SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:6所示的引物组或核苷酸序列如SEQ ID NO:7~SEQ ID NO:12所示的引物组。
2.根据权利要求1所示的LAMP引物组,其特征在于,所述LAMP引物组为核苷酸序列如SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:6所示的引物组。
3.权利要求1~2任一所述的LAMP引物组在制备检测曼氏血吸虫的试剂盒中的应用。
4.一种检测曼氏血吸虫的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒含有权利要求1~2任一所述的LAMP引物组。
5.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包含LAMP反应试剂,所述LAMP反应试剂为10×Reaction buffer、MgSO4、dNTP Mix、ddH2O和/或Bst3.0 DNApolymerase。
6.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包含LAMP反应稳定剂,所述LAMP反应稳定剂为液体石蜡油。
7.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包含LFD检测试纸条,所述LFD检测试纸条为质控线上包被有生物素抗体,检测线上包被有FAM单克隆抗体的LFD检测试纸条。
8.权利要求1~2任一所述的LAMP引物组和/或权利要求4~7任一所述的试剂盒在检测曼氏血吸虫中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述检测曼氏血吸虫包括:鉴定或辅助鉴定曼氏血吸虫和/或检测待测样品中是否含有曼氏血吸虫。
10.一种非诊断目的检测曼氏血吸虫的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1.提取待测样品的DNA,得到DNA样品;
S2.以步骤S1得到的DNA样品作为模板,利用权利要求1~2任一所述的引物组进行环介导等温扩增,收集得到环介导等温扩增产物;
S3.将步骤S2得到的环介导等温扩增产物滴加至权利要求7中所述LFD检测试纸条的加样区,得到检测结果;
LFD检测试纸条的质控线出现红色条带,检测线未出现红色条带时,检测结果为阴性,说明待测样品不含有曼氏血吸虫或曼氏血吸虫浓度低于最低检出限;LFD检测试纸条的质控线和检测线均出现红色条带时,检测结果为阳性,说明待测样品含有曼氏血吸虫;LFD检测试纸条的质控线和检测线均为出现红色条带时,检测结果失真,重新进行检测。
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