[发明专利]一种齐墩果烷型三萜酸及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种齐墩果烷型三萜酸化合物及其制备方法和应用，该化合物是一种C‑27位甲基高度氧化的齐墩果烷型三萜酸，为首次报道的新型化合物；其制备方法包括三萜酸部分的提取分离，利用现代波谱方法对结构进行鉴定。同时，体外细胞毒实验证明了该化合物能够抑制肿瘤细胞的增殖，在抗肿瘤方面有很大的潜力，有望作为新的抗肿瘤药物的先导化合物进行研究开发，也为大落新妇化学成分研究和药理活性探究提供物质基础。

技术领域

本发明涉及一种三萜酸及其制备方法和应用，具体涉及一种齐墩果烷型三萜酸及其制备方法和应用。

背景技术

大落新妇(Astilbe grandis Stapf ex Wils)又名红升麻、毛头寒药，是虎耳草科落新妇属植物。国内主要产自黑龙江、安徽、浙江、江西、福建、广东、广西、四川、贵州等省区。是我国民间常用药，中医药典中记载其根茎入药，常用于治疗跌打损伤、风湿性关节炎、风热感冒、咳嗽、毒蛇咬伤等，效果显著。此外，根据文献调研发现落新妇属植物的化学成分多为香豆素类、黄酮类、萜类、甾醇类、酸性成分、挥发油类等天然药物化学成分，还有抗炎镇痛、细胞毒性、抗肿瘤和抗氧化等药理活性。同时该植物中含有的C-27位甲基高度氧化的三萜酸与常见的C-28位甲基氧化的三萜酸不同，拥有更好的抗肿瘤活性。文献：大落新妇根中三萜类成分的研究，大落新妇化学成分的研究等，公开了大落新妇的提取方法，但是并没有提取到本发明所述的C-27位甲基高度氧化的齐墩果烷型三萜酸。

发明内容

发明目的：本发明旨在提供一种具有抗肿瘤活性的的齐墩果烷型三萜酸；本发明的另一目的在于提供一种所述齐墩果烷型三萜酸的制备方法；本发明的另一目的在于提供一种齐墩果烷型三萜酸在制备抗肿瘤药物中的应用。

技术方案：本发明所述的齐墩果烷型三萜酸，从大落新妇中提取分离得到，其结构式如下：

本发明提供了上述齐墩果烷型三萜酸的制备方法，主要包括以下几个步骤：

(1)将大落新妇的根茎粉碎，加入溶剂进行浸泡、抽滤、浓缩滤液，得到大落新妇乙醇提取物浸膏；

(2)将浸膏打散于水中，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取数次，分别得到石油醚浸膏、乙酸乙酯浸膏和正丁醇浸膏；

(3)将乙酸乙酯浸膏用硅胶色谱柱进行分离，采用二氯甲烷-甲醇体系进行梯度洗脱，得到7个组分Fr.A-G；

(4)将组分Fr.B用硅胶色谱柱洗脱分离，得到Fr.B1-B7；

(5)将Fr.B4用硅胶色谱柱经过石油醚-丙酮梯度洗脱得到Fr.B4.1-Fr.B4.20；

(6)将Fr.B4.20组分采用半制备高效液相色谱分析法，以乙腈-水为流动相，紫外检测器进行全波长检测，得到化合物。

进一步地，步骤(1)中所用的溶剂体积浓度为90-95％，浸泡7-10天，重复进行浸泡、抽滤、浓缩滤液，重复次数为5-7次，真空减压浓缩得到提取浸膏。

进一步地，步骤(4)中，所述硅胶色谱柱洗脱分离的条件为采用石油醚-乙酸乙酯体系，溶剂体积比为3：1，2：1，1：1和1：2依次梯度洗脱，所用硅胶为200-300目。

进一步地，步骤(6)中，所述半制备高效液相色谱分离条件为乙腈-水按体积比为80：20等度洗脱，3mL/min，30℃，时间每次为20min，按照出峰时间合并浓缩。

进一步地，对分离齐墩果烷型三萜酸先用硅胶柱分离，再用高效液相色谱分离纯化，制得齐墩果烷型三萜酸纯品，两步分离提纯步骤条件的筛选为制备目标化合物提供强有力的支撑。