[发明专利]乙酰乙酸含量检测试剂盒、其使用方法和检测装置

权利要求书

1.一种乙酰乙酸含量检测试剂盒，其特征在于，所述乙酰乙酸含量检测试剂盒包括R1试剂、R2试剂、R3试剂和R4试剂，其中，

所述R1试剂包括：β-羟丁酸脱氢酶、还原型辅酶Ⅰ和标准品；

所述R2试剂包括：显色剂1和显色剂2，所述显色剂1为WST-8；所述显色剂2为吩嗪硫酸甲酯、2,6-二氯酚靛酚、1,2,3-三氯丙烷和富勒烯苯基丁酸甲酯中的至少一种；

所述R3试剂包括：Tris-HCl缓冲液、Hepes缓冲液、硼酸缓冲液和PBS缓冲液中的至少一种，缓冲液的pH为5.5~7.0；

所述R4试剂包括：乙酰乙酸和乙酰乙酸锂中的至少一种作为标准品，浓度为0~2000μmol/L。

2.根据权利要求1所述的乙酰乙酸含量检测试剂盒，其特征在于，在所述R1试剂中，β-羟丁酸脱氢酶的酶活性为20~250KU/L。

3.根据权利要求1所述的乙酰乙酸含量检测试剂盒，其特征在于，在所述R1试剂中，所述还原型辅酶Ⅰ浓度为0.5~3.5mg/mL。

4.根据权利要求1所述的乙酰乙酸含量检测试剂盒，其特征在于，在所述R1试剂中，标准品为乙酰乙酸和乙酰乙酸锂中的至少一种；所述标准品的浓度为0~2000μmol/L。

5.根据权利要求1所述的乙酰乙酸含量检测试剂盒，其特征在于，所述R1试剂还包括第一缓冲液，所述第一缓冲液为Tris-HCl缓冲液、Hepes缓冲液、硼酸缓冲液和PBS缓冲液中的至少一种；所述第一缓冲液的pH为5.5~7.0；所述R2试剂还包括第二缓冲液，所述第二缓冲液为Tris-HCl缓冲液、Hepes缓冲液、硼酸缓冲液和PBS缓冲液中的至少一种；所述第二缓冲液的pH为5.5~7.0。

6.根据权利要求1所述的乙酰乙酸含量检测试剂盒，其特征在于，在所述R2试剂中，所述显色剂1的浓度为0.2~10mmol/L；所述显色剂2的浓度为0.02~5mmol/L；所述显色剂1和显色剂2的体积比为5~20:1。

7.根据权利要求1至6中任一所述的乙酰乙酸含量检测试剂盒，其特征在于，所述R1试剂还包括：表面活性剂、稳定剂和防腐剂中的至少一种；所述R2试剂还包括：表面活性剂、稳定剂和防腐剂中的至少一种。

8.根据权利要求7所述的乙酰乙酸含量检测试剂盒，其特征在于，在所述R1试剂中，所述表面活性剂的量为0.5~10g/L，所述稳定剂的量为0.01~0.5g/L，所述防腐剂的量为0.1~0.5g/L；在所述R2试剂中，所述表面活性剂的量为0.5~5g/L，所述稳定剂的量为5~10g/L，所述防腐剂的量为0.01~0.1g/L。

9.根据权利要求7所述的乙酰乙酸含量检测试剂盒，其特征在于，所述表面活性剂包括吐温-80、吐温-20、甘油和十二烷基硫酸钠中的至少一种；所述稳定剂包括巯基乙醇、二硫苏糖醇、海藻糖、谷胱甘肽和十二烷基二甲基甜菜碱中的至少一种；所述防腐剂包括红霉素、Proclin系列防腐剂、酚类防腐剂中的至少一种。

10.一种乙酰乙酸含量检测装置，其特征在于，包括如权利要求1至9中任选一项所述的乙酰乙酸含量检测试剂盒和分光光度计或者酶标仪，所述分光光度计或者酶标仪设置为检测450nm下的吸光度。