[发明专利]悬浮培养的牛肾细胞及其制备方法与应用

权利要求书

1.牛肾细胞，其特征在于，所述牛肾细胞名称为MDBK-V，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.45244。

2.一种利用权利要求1所述牛肾细胞培养病毒的方法，其特征在于，所述方法包括：

C1）在所述牛肾细胞上接种病毒；

C2）培养接种病毒后的牛肾细胞，得到培养液；

C3）从所述培养液中分离得到所述病毒。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，C2）中所述培养包括：将所述牛肾细胞在低血清培养基中悬浮培养扩增，然后接种至生物反应器，继续用所述低血清培养基在温度37℃、CO₂浓度为5%、溶氧30%~40%和pH 7.0-7.2的条件下培养。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，C2）中所述培养还包括在接种至生物反应器后的培养过程中，补加所述低血清培养基，然后在温度37℃、溶氧50%-60%和pH 7.0-7.2的条件下培养。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，补加低血清培养基的方法为：在接种至生物反应器后培养40~48小时补加所述低血清培养基，在温度37℃、CO₂浓度为5%、溶氧50%和pH 7.0-7.2的条件下继续培养至72小时，然后在温度37℃、CO₂浓度为5%、溶氧60%和pH7.0-7.2的条件下继续培养至96小时。

6.根据权利要求2-5任一所述的方法，其特征在于，所述病毒为牛传染性鼻气管炎病毒、牛副流感3型病毒、牛呼吸道合胞体病毒、牛病毒性腹泻病毒1型或牛病毒性腹泻病毒2型。

7.权利要求1所述的牛肾细胞的下述任一种应用：

D1）在病毒培养中的应用；

D2）在制备病毒或疫苗中的应用。

8.权利要求1所述的牛肾细胞的下述任一种应用：

D3）在牛传染性鼻气管炎病毒培养、牛副流感3型病毒培养、牛病毒性腹泻病毒1型病毒培养、牛病毒性腹泻病毒2型病毒培养或牛呼吸道合胞体病毒培养中的应用；

D4）在制备牛传染性鼻气管炎病毒、牛副流感3型病毒、牛病毒性腹泻病毒1型、牛病毒性腹泻病毒2型或牛呼吸道合胞体病毒中的应用；

D5）在制备牛传染性鼻气管炎病毒疫苗、牛副流感3型病毒疫苗、牛病毒性腹泻病毒1型疫苗、牛病毒性腹泻病毒2型疫苗或牛呼吸道合胞体病毒疫苗中的应用。