[发明专利]儿茶酚胺代谢物的提取和检测试剂盒及检测方法

权利要求书

1.提取和检测儿茶酚胺代谢物的试剂盒，其包括淋洗液、洗脱液和磁悬液，

所述洗脱液为甲酸和乙腈的混合液；

所述磁悬液的制备方法为：利用有机溶剂处理磁珠后，以磷酸盐缓冲液重悬，制得所述磁悬液；

所述有机溶剂包括甲醇和乙腈的混合液、甲醇或乙腈中的任意一种。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述洗脱液中，甲酸的体积占比为0.2％～10％。

3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述磁悬液中的磁珠为羧基磁珠。

4.根据权利要求1～3任一项所述的试剂盒，其特征在于，

所述试剂盒中还包括内标工作液；

所述内标工作液为含有甲氧基肾上腺素-d3、去甲变肾上腺素-d3、3-甲氧酪胺-d4的盐酸水溶液。

5.儿茶酚胺代谢物的检测方法，其特征在于，包括：利用权利要求1～4任一项所述的试剂盒对样本进行前处理，获得前处理液后，利用液相色谱串联质谱系统对所述前处理液进行检测。

6.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述前处理包括：

内标工作液、样本和磁悬液经第一混匀去上清后获得混合物；

所述混合物经洗涤、淋洗后洗脱，获得所述前处理液；

所述洗涤的试剂为纯化水；

所述淋洗的试剂为淋洗液；

所述洗脱的试剂为洗脱液。

7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，

所述洗涤为混合物与洗涤液进行第二混匀；

所述淋洗为洗涤的产物与淋洗液进行第三混匀；

所述第一混匀的液面高度≤第二混匀的液面高度；

所述第三混匀的液面高度≤第二混匀的液面高度。

8.根据权利要求5～7任一项所述的检测方法，其特征在于，

所述样本和洗脱液的体积比大于1。

9.根据权利要求5～8任一所述的检测方法，其特征在于，

所述液相色谱串联质谱系统的色谱条件包括：

色谱柱为HILIC色谱柱；

流动相A为包括：水、0.1M甲酸铵和1vol％甲酸；

流动相B为乙腈；

洗脱程序为：

第0～1.0min，流动相B的体积分数由100％至70％；

第1.0～3.0min，流动相B的体积分数由70％至60％；

第3.0～3.5min，流动相B的体积分数为60％；

第3.5～3.6min，流动相B的体积分数由60％至100％；

第3.6～5.0min，流动相B的体积分数为100％。

10.根据权利要求5～9任一项所述的检测方法，其特征在于，所述儿茶酚胺代谢物包括甲氧基肾上腺素、去甲变肾上腺素和/或3-甲氧酪胺中的至少一种。