[发明专利]降解吲哚的重组表达载体及其构建方法与应用在审
申请号: | 202310380957.2 | 申请日: | 2023-04-11 |
公开(公告)号: | CN116426557A | 公开(公告)日: | 2023-07-14 |
发明(设计)人: | 邓俊劲;李家洲;王志林;李洋 | 申请(专利权)人: | 广东省农业科学院农业生物基因研究中心 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N15/62;C12N15/66;C12N1/21;C02F11/02;C12R1/19 |
代理公司: | 北京远大卓悦知识产权代理有限公司 11369 | 代理人: | 李开成 |
地址: | 510640 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 降解 吲哚 重组 表达 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
1.降解吲哚的重组表达载体的构建方法,其特征在于,将组成型启动子PthrC、来源于海氏肠球菌的氧化酶基因ycnE与还原酶基因ydgI构建到表达载体pet28a,得到所述重组表达载体。
2.根据权利要求1所述的降解吲哚的重组表达载体的构建方法,其特征在于,组成型启动子PthrC、氧化酶基因ycnE与还原酶基因ydgI连接,构成PthrC-ydgI-ycnE片段;利用EcoRI和XbaI酶进行双酶切将PthrC-ydgI-ycnE片段连接至质粒pet28a,得到所述重组表达载体。
3.根据权利要求1所述的降解吲哚的重组表达载体的构建方法,其特征在于,组成型启动子PthrC序列如SEQ ID NO.1所示,氧化酶基因ycnE序列如SEQ ID NO.2所示,还原酶基因ydgI序列如SEQ ID NO.3所示。
4.降解吲哚的重组表达载体,其特征在于,通过权利要求1-3任一项所述的构建方法制得。
5.降解吲哚的重组大肠杆菌,其特征在于,包含如权利要求1-3任一项所述的重组表达载体。
6.根据权利要求5所述的降解吲哚的重组大肠杆菌的构建方法,其特征在于,重组表达载体通过热击转入大肠杆菌。
7.根据权利要求5所述的降解吲哚的重组大肠杆菌的应用,其特征在于,用于降解大肠杆菌培养基质中包含的吲哚。
8.根据权利要求7所述的降解吲哚的重组大肠杆菌的应用,其特征在于,吲哚的浓度为0-0.2g/L。
9.根据权利要求5所述的降解吲哚的重组大肠杆菌的应用,其特征在于,重组大肠杆菌的培养温度为30-37℃,转速为120-250rpm,培养时间为4-48h。
10.根据权利要求5所述的降解吲哚的重组大肠杆菌的应用,其特征在于,重组大肠杆菌在培养基质中的接种量为0.5%-5%。
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