[发明专利]降解吲哚的重组表达载体及其构建方法与应用在审

专利信息
申请号: 202310380957.2 申请日: 2023-04-11
公开(公告)号: CN116426557A 公开(公告)日: 2023-07-14
发明(设计)人: 邓俊劲;李家洲;王志林;李洋 申请(专利权)人: 广东省农业科学院农业生物基因研究中心
主分类号: C12N15/70 分类号: C12N15/70;C12N15/62;C12N15/66;C12N1/21;C02F11/02;C12R1/19
代理公司: 北京远大卓悦知识产权代理有限公司 11369 代理人: 李开成
地址: 510640 广*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 降解 吲哚 重组 表达 载体 及其 构建 方法 应用
【权利要求书】:

1.降解吲哚的重组表达载体的构建方法,其特征在于,将组成型启动子PthrC、来源于海氏肠球菌的氧化酶基因ycnE与还原酶基因ydgI构建到表达载体pet28a,得到所述重组表达载体。

2.根据权利要求1所述的降解吲哚的重组表达载体的构建方法,其特征在于,组成型启动子PthrC、氧化酶基因ycnE与还原酶基因ydgI连接,构成PthrC-ydgI-ycnE片段;利用EcoRI和XbaI酶进行双酶切将PthrC-ydgI-ycnE片段连接至质粒pet28a,得到所述重组表达载体。

3.根据权利要求1所述的降解吲哚的重组表达载体的构建方法,其特征在于,组成型启动子PthrC序列如SEQ ID NO.1所示,氧化酶基因ycnE序列如SEQ ID NO.2所示,还原酶基因ydgI序列如SEQ ID NO.3所示。

4.降解吲哚的重组表达载体,其特征在于,通过权利要求1-3任一项所述的构建方法制得。

5.降解吲哚的重组大肠杆菌,其特征在于,包含如权利要求1-3任一项所述的重组表达载体。

6.根据权利要求5所述的降解吲哚的重组大肠杆菌的构建方法,其特征在于,重组表达载体通过热击转入大肠杆菌。

7.根据权利要求5所述的降解吲哚的重组大肠杆菌的应用,其特征在于,用于降解大肠杆菌培养基质中包含的吲哚。

8.根据权利要求7所述的降解吲哚的重组大肠杆菌的应用,其特征在于,吲哚的浓度为0-0.2g/L。

9.根据权利要求5所述的降解吲哚的重组大肠杆菌的应用,其特征在于,重组大肠杆菌的培养温度为30-37℃,转速为120-250rpm,培养时间为4-48h。

10.根据权利要求5所述的降解吲哚的重组大肠杆菌的应用,其特征在于,重组大肠杆菌在培养基质中的接种量为0.5%-5%。

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