[发明专利]耐受重金属且具有重金属处理能力的集胞藻基因工程菌及构建方法与应用在审
申请号: | 202310253344.2 | 申请日: | 2023-03-16 |
公开(公告)号: | CN116555140A | 公开(公告)日: | 2023-08-08 |
发明(设计)人: | 孙韬;霍怀舒;陈磊;解亚茹;张卫文 | 申请(专利权)人: | 天津大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/54;C12N15/11;C12N15/74;C02F3/34;C12R1/01;C02F101/20 |
代理公司: | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人: | 陆艺 |
地址: | 300072*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 耐受 重金属 具有 处理 能力 集胞藻 基因工程 构建 方法 应用 | ||
1.耐受重金属且具有重金属处理能力的集胞藻基因工程菌的构建方法,其特征是包括如下步骤:
(1)构建载体pJA2-Ptho-PCS-Ptho-MT:
将pJA2-SPE-Ptho-Trbcl质粒骨架与编码植物螯合蛋白合成酶的基因pcs通过重组连接组装成载体pJA2-Ptho-PCS;
将pJA2-SPE-Ptho-Trbcl质粒骨架与编码金属硫蛋白的基因mt连接组装成载体pJA2-Ptho-MT;
以pJA2-Ptho-PCS为模板,以SEQ ID NO.10和SEQ ID NO.11所示核苷酸序列为上、下游引物,反向PCR扩增得到pJA2-Ptho-PCS质粒骨架;
以pJA2-Ptho-MT为模板,以SEQ ID NO.12和SEQ ID NO.13所示核苷酸序列为上、下游引物,PCR扩增得到Ptho-MT-Trbcl片段;
将pJA2-Ptho-PCS质粒骨架与Ptho-MT-Trbcl片段通过重组连接,得到载体pJA2-Ptho-PCS-Ptho–MT;
所述pJA2-SPE-Ptho-Trbcl质粒骨架的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;
所述基因pcs的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;
所述基因mt的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;
(2)通过自然转化,将步骤(1)获得的载体pJA2-Ptho-PCS-Ptho-MT转入集胞藻中,获得耐受重金属且具有重金属处理能力的集胞藻基因工程菌。
2.权利要求1的方法构建的耐受重金属且具有重金属处理能力的集胞藻基因工程菌。
3.权利要求2的耐受重金属且具有重金属处理能力的集胞藻基因工程菌在重金属生物处理中的应用。
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