[发明专利]短肽Fmoc-L-Ile-Aib-OH及其制备方法

权利要求书

1.短肽Fmoc-L-Ile-Aib-OH，其特征在于，结构式如下：

2.权利要求1所述短肽Fmoc-L-Ile-Aib-OH的制备方法，其特征在于，采用液相合成法，包括以下步骤：

(1)将α-甲基丙氨酸即H-Aib-OH与醇即ROH反应成酯以保护羧基，制得H-Aib-OR；

(2)将N-芴甲氧羰基异亮氨酸即Fmoc-L-Ile-OH与H-Aib-OR偶联，制得全保护二肽Fmoc-L-Ile-Aib-OR；

(3)将Fmoc-L-Ile-Aib-OR水解，得到短肽H-L-Ile-Aib-OH，再将其与9-芴甲基-N-琥珀酰亚胺基碳酸酯即Fmoc-OSu反应以保护氨基，制得目标短肽Fmoc-L-Ile-Aib-OH；

上述ROH、H-Aib-OR和Fmoc-L-Ile-Aib-OR中的R为甲基或乙基。

3.如权利要求2所述短肽Fmoc-L-Ile-Aib-OH的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将H-Aib-OH与ROH在二氯亚砜即SOCl₂催化下发生酯化反应，制得H-Aib-OR盐酸盐即H-Aib-OR.HCl；

(2)将Fmoc-L-Ile-OH与H-Aib-OR.HCl在活化剂、缚酸剂、缩合剂存在下于有机溶剂中进行缩合反应，制得Fmoc-L-Ile-Aib-OR；

(3)将Fmoc-L-Ile-Aib-OR在碱性条件下于溶剂中发生水解反应，得到短肽H-L-Ile-Aib-OH，再将其与Fmoc-OSu在碱性条件下反应，制得目标短肽Fmoc-L-Ile-Aib-OH。

4.如权利要求3所述短肽Fmoc-L-Ile-Aib-OH的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)控制温度在0℃以下，向ROH中加入SOCl₂，搅拌，再加入H-Aib-OH，搅拌，升温至20～50℃反应；反应结束，浓缩，加入二氯甲烷即DCM，减压旋蒸，制得H-Aib-OR.HCl；(2)控制温度在0℃以下，向有机溶剂中加入H-Aib-OR.HCl和缚酸剂，搅拌，加入Fmoc-L-Ile-OH和活化剂，搅拌，再加入缩合剂，搅拌，升温至10～30℃反应；反应结束，有机层依次用pH 7-8的碱水、pH4-5的酸水、10％NaCl溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，固液分离，液体浓缩，加入石油醚即PE，结晶，固液分离，固体干燥，制得Fmoc-L-Ile-Aib-OR；(3)将Fmoc-L-Ile-Aib-OR溶于溶剂中，加碱调节pH至11-12，搅拌反应；反应结束，加酸调节pH为8-9，用乙酸乙酯即EA和PE混合萃取除杂后，加入Fmoc-OSu进行反应，过程中加碱维持pH为8-9；反应结束，用EA和PE混合萃取除杂，加入EA，调节pH至3-4，搅拌，静置，收集EA层，用10％NaCl溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，固液分离，液体浓缩，加入PE，结晶，固液分离，固体干燥，制得Fmoc-L-Ile-Aib-OH。

5.如权利要求3或4所述短肽Fmoc-L-Ile-Aib-OH的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述H-Aib-OH与SOCl₂的摩尔比为1:1.2，H-Aib-OH与ROH的用量比为1mol:1L；反应温度为30～40℃。

6.如权利要求3或4所述短肽Fmoc-L-Ile-Aib-OH的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述活化剂为1-羟基苯并三氮唑即HOBt，缩合剂为N,N’-二异丙基碳二亚胺即DIC或N,N’-二环己基碳二亚胺即DCC，缚酸剂为N,N-二异丙基乙胺即DIEA、N-甲基吗啉即NMM或三乙胺即TEA，有机溶剂为DCM或四氢呋喃即THF。

7.如权利要求3或4所述短肽Fmoc-L-Ile-Aib-OH的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述Fmoc-L-Ile-OH、活化剂、H-Aib-OR.HCl、缚酸剂、缩合剂的摩尔比为1:1:1.2:1.2:1.2；反应温度为20～30℃。