[发明专利]一种甾醇侧链裂解酶、复合生物酶制剂及制备黄体酮的方法在审
| 申请号： | 202310223531.6 | 申请日： | 2023-03-06 |
| 公开（公告）号： | CN116355869A | 公开（公告）日： | 2023-06-30 |
| 发明（设计）人： | 罗敏;毛理江;王友富;王洪福;王瑞 | 申请（专利权）人： | 浙江神洲药业有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/02 | 分类号： | C12N9/02;C12N9/04;C12P33/00 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 申素霞 |
| 地址： | 317306 浙江省台州市*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 甾醇侧链 裂解 复合 生物 酶制剂 制备 黄体酮 方法 | ||
1.一种甾醇侧链裂解酶，其编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种复合生物酶制剂，包括甾醇氧化酶、黄素单核苷酸和权利要求1所述甾醇侧链裂解酶；所述甾醇氧化酶的编码基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示。
3.根据权利要求2所述的复合生物酶制剂，其特征在于，所述甾醇侧链裂解酶、甾醇氧化酶与黄素单核苷酸的质量比为(0.01～0.02)：(0.015～0.03)：(0.001～0.002)。
4.一种制备黄体酮的方法，包括以下步骤：
将甾醇类物质、磷酸盐、有机溶剂、水与复合生物酶制剂混合，进行生物酶催化反应，得到黄体酮；
所述复合生物酶制剂为权利要求2或3所述复合生物酶制剂；
所述甾醇类物质具有式I所示结构：
式I中R为碳原子个数≤10的烷基、烯基或炔基。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述甾醇类物质包括植物甾醇、胆固醇和木甾醇中的一种或几种。
6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于，所述甾醇类物质与复合生物酶制剂的质量比为1：(0.026～0.052)。
7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述磷酸盐包括磷酸二氢钾或磷酸氢二钾。
8.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述有机溶剂包括叔丁醇、异丙醇、乙醇、甲醇或乙腈。
9.根据权利要求4、5、7或8所述的方法，其特征在于，所述甾醇类物质、有机溶剂、磷酸盐与水的质量比为1：(2～3)：(0.025～0.03)：(7～10)。
10.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述生物酶催化反应的温度为25～32℃，时间为20～26h；所述生物酶催化反应在pH值为6.8～7.2条件下进行。
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