[发明专利]甘露聚糖结合型丝氨酸蛋白酶同系物及其制备方法和应用在审
申请号: | 202310196396.0 | 申请日: | 2023-03-03 |
公开(公告)号: | CN116286754A | 公开(公告)日: | 2023-06-23 |
发明(设计)人: | 张嵘;王夏璐;张景海 | 申请(专利权)人: | 沈阳药科大学 |
主分类号: | C12N9/64 | 分类号: | C12N9/64;C12N15/57;C07K19/00;C07K16/40 |
代理公司: | 大连东方专利代理有限责任公司 21212 | 代理人: | 周媛媛;李馨 |
地址: | 117004 辽宁省本*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 甘露 聚糖 结合 丝氨酸 蛋白酶 同系物 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种甘露聚糖结合型丝氨酸蛋白酶同系物,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ IDNO:1所示。
2.根据权利要求1所述的甘露聚糖结合型丝氨酸蛋白酶同系物,其特征在于,所述的甘露聚糖结合型丝氨酸蛋白酶同系物来源于鳞翅目(Lepidoptera)天(大)蚕蛾科(Saturniidae)昆虫,选自柞蚕、蓖麻蚕、天蚕、印度柞蚕、琥珀蚕、美国柞蚕、樗蚕、大山蚕、美洲天蚕、樟蚕、枫蚕中的一种。
3.编码权利要求1或2所述的甘露聚糖结合型丝氨酸蛋白酶同系物的基因。
4.根据权利要求3所述的甘露聚糖结合型丝氨酸蛋白酶同系物的基因,其特征在于,所述的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
5.权利要求1或2所述的甘露聚糖结合型丝氨酸蛋白酶同系物的衍生物或类似物或活性片段,其特征在于,包含氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示全部序列或部分序列,且具有甘露聚糖结合型丝氨酸蛋白酶同系物的生物学活性。
6.根据权利要求5所述的甘露聚糖结合型丝氨酸蛋白酶同系物的衍生物或类似物或活性片段,其特征在于,所述的甘露聚糖结合型丝氨酸蛋白酶同系物的衍生物或类似物或活性片段选自Met-MSPH、Met-组氨酸标签-MSPH、Met-MSPH-His6标签、Met-His6标签-凝血酶酶切位点-MSPH、Met-GST标签-凝血酶酶切位点-MSPH、Met-MSPH-凝血酶酶切位点-GST标签、Met-MSPH-Flag标签、Met-Flag标签-MSPH、Met-His6标签-SUMO标签-凝血酶酶切位点-MSPH、Met-His6标签-SUMO标签-凝血酶酶切位点-MSPH-His6标签序列。
7.权利要求1或2所述的甘露聚糖结合型丝氨酸蛋白酶同系物的制备方法,其特征在于,利用鳞翅目天蚕蛾科昆虫的血淋巴、血液、血细胞裂解物、淋巴液、匀浆液中的一种或两种以上的组合作为原料液,通过离子交换层析、疏水层析、亲和层析、凝胶过滤、盐析或超滤方法中一种或两种以上方法的组合获得电泳纯乃至HPLC纯度的甘露聚糖结合型丝氨酸蛋白酶同系物;
或者将编码所述的甘露聚糖结合型丝氨酸蛋白酶同系物的基因克隆入重组表达载体,导入宿主细胞,获得重组表达的甘露聚糖结合型丝氨酸蛋白酶同系物。
8.权利要求5或6所述的甘露聚糖结合型丝氨酸蛋白酶同系物的衍生物或类似物或活性片段的制备方法,其特征在于,将编码所述的甘露聚糖结合型丝氨酸蛋白酶同系物的衍生物或类似物或活性片段的基因克隆入重组表达载体,导入宿主细胞,分离纯化后获得重组表达的甘露聚糖结合型丝氨酸蛋白酶同系物的衍生物或类似物或活性片段。
9.权利要求1或2所述的甘露聚糖结合型丝氨酸蛋白酶同系物或权利要求5或6所述的甘露聚糖结合型丝氨酸蛋白酶同系物的衍生物或类似物或活性片段的抗体,其特征在于,以所述的天然甘露聚糖结合型丝氨酸蛋白酶同系物或所述的甘露聚糖结合型丝氨酸蛋白酶同系物的衍生物或类似物或活性片段作为抗原,刺激小鼠或大鼠或家兔或犬或羊或马或牛的免疫系统产生。
10.权利要求1或2所述的甘露聚糖结合型丝氨酸蛋白酶同系物或权利要求5或6所述的甘露聚糖结合型丝氨酸蛋白酶同系物的衍生物或类似物或活性片段或权利要求9所述的抗体在影响酚氧化酶原激活系统、抗菌肽合成、微生物及其相关分子模式检测中的应用。
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