[发明专利]一种灵敏度提高的化学发光检测方法及应用、试剂盒

权利要求书

1.一种灵敏度提高的化学发光检测方法，其特征在于，通过信号放大体系提高对待测物的检测灵敏度；

所述信号放大体系的获取过程为：

将待测物的单克隆抗体链接生物素，得生物素化抗体；

向固相载体上链接链霉亲和素抗体；

链霉亲和素抗体与链霉亲和素反应，生物素化抗体上的生物素与链霉亲和素反应，获得待测物单克隆抗体链接至固相载体上的信号放大体系。

2.根据权利要求1所述的一种灵敏度提高的化学发光检测方法，其特征在于，所述固相载体采用磁珠微粒。

3.根据权利要求2所述的一种灵敏度提高的化学发光检测方法，其特征在于，包括：

(1)制备磁珠组分，所述磁珠组分包括由磁珠、链霉亲和素抗体、链霉亲和素、待测物单克隆抗体1、生物素酯为原料形成的信号放大体系；

(2)制备酶组分；

(3)将磁珠组分、待测物、酶组分孵育，形成免疫复合物，清洗，与底物反应产生光信号，计算待测物浓度。

4.根据权利要求3所述的一种灵敏度提高的化学发光检测方法，其特征在于，所述磁珠组分的制备过程为：

(1)将用缓冲液透析过夜后的待测物单克隆抗体1与生物素酯按比例混合反应，得生物素化抗体；

(2)将磁珠清洗活化后，与链霉亲和素抗体偶联，封闭，磁珠磁分离；

(3)将(2)中磁分离后的磁珠、链霉亲和素、生物素化抗体进行包被；

(4)对包被产物室温封闭，缓冲液清洗，重悬磁珠配制工作液。

5.根据权利要求4所述的一种灵敏度提高的化学发光检测方法，其特征在于，所述待测物单克隆抗体1与生物素酯按1mg抗体：(1.33uL～13.3uL)10mmol/L生物素酯的比例混合反应。

6.根据权利要求4所述的一种灵敏度提高的化学发光检测方法，其特征在于，所述磁分离后的磁珠、链霉亲和素、生物素化抗体按照1mg:(1ug～10ug):(4ug～40ug)的比例进行包被。

7.根据权利要求3所述的一种灵敏度提高的化学发光检测方法，其特征在于，所述酶组分的制备过程为：

(1)将待测物单克隆抗体2、碱性磷酸酶透析过夜；

(2)将透析过夜后的待测物单克隆抗体2中加入SMCC溶液，反应，透析过夜；

将透析过夜后的碱性磷酸酶中加入2-IT溶液，反应，透析过夜；

(3)将(1)和(2)的产物混合进行反应，制备工作液。

8.根据权利要求7所述的一种灵敏度提高的化学发光检测方法，其特征在于，步骤(3)中，(1)和(2)的产物按照体积比为1:1～2:1混合反应。

9.根据权利要求1～8任一项所述的化学发光检测方法在提高定量检测GFAP试剂盒灵敏度或定量检测UCH-L1试剂盒中的应用。

10.一种试剂盒，其特征在于，包括如权利要求1～8任一项所述的信号放大体系。