[发明专利]一种无血清昆虫培养基及应用

权利要求书

1.一种无血清昆虫培养基，其特征在于，包括基础培养基和添加剂，所述添加剂包括的各组分在无血清培养基中的浓度如下：葡萄糖5-7g/L、蛋白水解物10-16g/L、嘌呤类物质10-20mg/L、PF68 1-3g/L以及细胞生长因子20-50mg/L；

所述蛋白水解物为酵母水解物和麦芽水解物的混合物；

所述嘌呤类物质为腺嘌呤和鸟嘌呤的混合物；

所述腺嘌呤和鸟嘌呤的混合物在无血清昆虫培养基中的浓度为10-20mg/L；

所述细胞生长因子为EGF、FGF和IGF中的一种或两种以上的组合；

所述基础培养基为Grace’s Insect Medium培养基。

2.如权利要求1所述的无血清昆虫培养基在全悬浮培养昆虫细胞中的应用。

3.一种利用权利要求1所述的无血清昆虫培养基进行全悬浮培养昆虫细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、将葡萄糖、蛋白水解物、嘌呤类物质、PF68以及细胞生长因子加入基础培养基中，至物质全部溶解后，加入1g/L的碳酸氢钠，定容后，调节其pH至6.35-6.45，过滤除菌，得到无血清昆虫培养基备用；

S2、将昆虫细胞接种至上述无血清昆虫培养基中，不添加血清，置于无CO₂条件下，27-28℃，80-120rpm摇床培养。

4.根据权利要求3所述的全悬浮培养昆虫细胞的方法，其特征在于，步骤S2中，所述昆虫细胞为Sf-9、Sf-21或者High-five细胞。

5.根据权利要求3所述的全悬浮培养昆虫细胞的方法，其特征在于，步骤S2中，所述接种时的接种量为5-10×10⁵/mL。