[发明专利]一种组织专一性VEGF表达下调载体的构建方法在审
申请号: | 202310134082.8 | 申请日: | 2023-02-20 |
公开(公告)号: | CN116042717A | 公开(公告)日: | 2023-05-02 |
发明(设计)人: | 张淑芝;魏文庆;郑耀武 | 申请(专利权)人: | 潍坊学院 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N15/12 |
代理公司: | 北京盛询知识产权代理有限公司 11901 | 代理人: | 郭成文 |
地址: | 261061 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 组织 专一性 vegf 表达 下调 载体 构建 方法 | ||
1.一种组织专一性VEGF表达下调载体的构建方法,其特征在于,包括将组织专一性启动子和四环素调控转录沉默子依次插入至表达载体中的步骤。
2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,具体步骤为:
分别PCR扩增得组织专一性启动子HB片段和四环素调控转录沉默子tetR-Krab片段,将tetR-Krab片段连接至pCAGGS表达载体,获得pCAGGS-tetR-Krab重组质粒,之后与HB片段连接,得到组织专一性VEGF表达下调载体pCAGGS-HB-tetR-Krab。
3.根据权利要求2所述的构建方法,其特征在于,所述组织专一性VEGF表达下调载体为视网膜专一性VEGF表达下调载体。
4.根据权利要求2所述的构建方法,其特征在于,所述组织专一性启动子HB片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;所述四环素调控转录沉默子tetR-Krab片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。
5.一种如权利要求1-4任一项所述的构建方法获得的组织专一性VEGF表达下调载体。
6.一种如权利要求5所述的组织专一性VEGF表达下调载体在制备组织专一性下调VEGF基因表达的动物模型中的应用。
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