[发明专利]分析血清中四溴双酚A双（2,3-二溴丙基醚）的前处理方法

说明书

一种用于分析血清中四溴双酚A双(2,3‑二溴丙基醚)的前处理方法，血清样品在丙酮和正己烷混合溶液中丙酮作用下蛋白变性沉淀，使用二氯甲烷和正己烷的混合溶液进行振荡萃取，再使用Supelclean ENVI‑Carbsupgt;TM/supgt;固相萃取柱进行净化和浓缩，使用高效液相色谱串联质谱进行检测。本申请的方法可以有效提取血清中TBBPA‑BDBPE并对含量进行定量研究，所需血清量较少、操作简单、回收率较高，为四溴双酚A双(2,3‑二溴丙基醚)的环境与健康研究提供基础方法。

技术领域

本发明涉及环境污染物检测领域，具体涉及一种分析血清中新污染物四溴双酚A双(2,3-二溴丙基醚)的前处理方法。

背景技术

四溴双酚A双(2,3-二溴丙基醚)(TBBPA-bis(2,3-dibromopropyl ether)，TBBPA-BDBPE，别称“八溴醚”)是溴系阻燃剂四溴双酚A的替代品，广泛应用在聚丙烯、高低密度聚乙烯和高抗冲聚苯乙烯等聚合物的生产中。作为添加型阻燃剂，TBBPA-BDBPE很容易从聚合物中释放进入环境。目前，TBBPA-BDBPE已经在全球各地和包括海洋软体动物在内的多种环境基质中有检出，说明其具有广泛的环境赋存，存在较大的人体暴露风险。

血液循环在保证机体新陈代谢的进行的同时，也会将进入生物体内的有机污染物输送全身进行分布或者代谢，因此血液是了解人体或者动物有机污染物污染情况的重要生物样品。但是血液中有机物种类复杂、含量高，基质效应较强，再加上采样量的限制，血液中有机污染物的分析具有较大的难度。

TBBPA-BDBPE已经成为备受关注的新污染物。研究其在血清中的浓度以及分布规律对阐释TBBPA-BDBPE的生物有效性及其对人类健康影响具有重要意义。因此需要建立分析血清中TBBPA-BDBPE的前处理方法。现有技术中尚未有TBBPA-BDBPE的血清分析见诸报道，本申请系发明人在该领域首次进行相关研究。

发明内容

本发明的目的是针对血清样品基质复杂的问题提供一种样品用量少、回收率高、除杂效果好以及处理速度快的前处理方法，实现对血清样品中TBBPA-BDBPE的定量分析。本发明采用沉淀蛋白后振荡萃取的方式提取血清中TBBPA-BDBPE，采用Supelclean ENVI-Carb^TM固相萃取柱去除血清中基质和浓缩TBBPA-BDBPE，保证提取效率的同时减少前处理过程中TBBPA-BDBPE的损失。

为实现上述目的，建立了一种分析血清中四溴双酚A双(2,3-二溴丙基醚)的前处理方法，包括以下步骤：

(1)将稳定同位素¹³C标记双甲基化四溴双酚A(¹³C₁₂-TBBPA-BME)与血清混合，加入小钢珠，涡旋使其混合均匀；

(2)加入正己烷和丙酮的混合溶液，涡旋30s后，使用组织研磨仪振荡萃取；

(3)离心机离心后，提前上清液，并重复萃取及离心三次；

(4)继续加入正己烷和二氯甲烷的混合溶液，使用组织研磨仪振荡萃取，离心机离心后，提前上清液，并重复萃取及离心三次；

(5)收集六次离心后的上清液，使用氮吹仪氮吹至近干，复溶于正己烷和二氯甲烷的混合溶液；

(6)分别使用正己烷和二氯甲烷活化固相萃取柱后，步骤(5)获得的复溶后混合溶液上样后，使用正己烷和二氯甲烷的混合溶液进行净化洗脱；

(7)收集净化后的溶液氮吹至近干后，置换溶剂为甲醇，转移至进样小瓶中；

(8)复溶后，加入稳定¹³C同位素标记的四溴双酚A(¹³C₁₂-TBBPA)作为进样内标，使用高效液相色谱串联质谱仪检测TBBPA-BDBPE的浓度。