[发明专利]一种基于磁控量子点CRISPR报告元件的弓形虫核酸检测方法

权利要求书

1.一种磁控量子点报告元件，其特征在于，该磁控量子点报告元件由链霉亲和素化磁珠、生物素化DNA1和量子点-DNA2组装而成，所述的链霉亲和素化磁珠与生物素化DNA1相连，所述的量子点-DNA2通过DNA1与DNA2序列互补，连接在磁珠上。

2.根据权利要求1所述的磁控量子点报告元件，其特征在于，所述磁控量子点报告元件的制备过程为：由链霉亲和素化磁珠和生物素化DNA1在BindingWashing缓冲液中混合连接，然后利用磁铁吸附磁珠，用缓冲液洗去游离生物素化DNA1，再加入量子点-DNA2在缓冲液中混合连接，用缓冲液洗去游离量子点-DNA2，获得磁控量子点报告元件。

3.根据权利要求1或2所述的磁控量子点报告元件，其特征在于，所述的量子点-DNA2由CdCl₂、MPA、Na₂TO₃、NaBH₄和DNA2在pH9.5～11.5溶液环境下90℃加热1～3h合成；优选的，所述的溶液环境中CdCl₂、MPA、Na₂TeO₃、NaBH₄和DNA2的浓度为：CdCl₂ 15～25mM，MPA 15～25mM，Na₂TeO₃ 1～10mM，NaBH₄ 5～15mM，DNA250nM～500nM；进一步优选的，所述的溶液环境中CdCl₂、MPA、Na₂TeO₃、NaBH₄和DNA2的浓度为：CdCl₂ 20mM，MPA 20mM，Na₂TeO₃ 1mM，NaBH₄10mM，DNA2 100nM。

4.根据权利要求1或2所述的磁控量子点报告元件，其特征在于，所述的生物素化DNA1为：CGGTAATAGGAAAGTGTGTAAACTGAATA-Biotin；

所述的DNA2的核苷酸序列为：

TATTCAGTTTACACACTTTCCTATTACCGTACTATTAG*G*G*G*G*G*G*G*G，其中*代表的是硫代磷酸化修饰。

5.一种基于磁控量子点报告元件的CRISPR/Cas12a生物传感器，其特征在于，该生物传感器包含权利要求1～4中任意一项所述的磁控量子点报告元件、CRISPR/Cas12a识别体系和RAA扩增体系；所述的CRISPR/Cas12a识别体系包括crRNA和Cas12a蛋白，两者通过氢键紧密结合，crRNA能识别目标核酸，诱导Cas12a蛋白激活；所述RAA扩增体系为包含特异性引物对的RAA试剂盒。

6.根据权利要求5所述的CRISPR/Cas12a生物传感器，其特征在于，所述crRNA为crRNA1或crRNA2，

crRNA1：UAAUUUCUACUAAGUGUAGAUCACCCUCCAGGAAAAGCAGCCA；

crRNA2：UAAUUUCUACUAAGUGUAGAUCTCGTGGTGATGGCGGAGAG。