[发明专利]一种特异性检测槟榔黄化植原体的巢式引物组、试剂盒及其检测方法

权利要求书

1.一种特异性检测槟榔黄化植原体的巢式引物组，其特征在于，所述引物组可用于扩增槟榔黄化植原体的583bp左右的特异性序列，所述巢式PCR引物组由第一轮扩增的上游引物，第一轮扩增的下游引物，第二轮扩增上游引物，第二轮扩增下游引物组成，其中，所述引物对序列如下所示：

第一轮扩增上游引物P_N1-F：5′-TGCAATAACGCGTGCTAAAC-3′

第一轮扩增下游引物P_N1-R：5′-AAACGTTTCCTTACTTGCCCC-3′

第二轮扩增上游引物P_N2-F3：5′-CGCGTGCTAAACATGATATTGA-3′

第二轮扩增下游引物P_N2-R3：5′-TGTGAAGAATCTCGATAATGCCT-3′。

2.一种用于检测剑槟榔黄化植原体的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含如权利要求1所述的巢式PCR引物组。

3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还包括PCR反应试剂。

4.如权利要求1所述的引物组或如权利要求2或3所述的试剂盒在高效检测槟榔黄化植原体中的应用。

5.一种用于高效检测槟榔黄化植原体的方法，其特征在于，所述方法包括使用如权利要求1所述的巢式引物组或如权利要求2或3所述的试剂盒进行巢氏PCR扩增的步骤。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述巢式PCR扩增包括以下步骤：

步骤1，从样品中提取基因组DNA：

步骤2，使用第一个方面所述的巢式PCR引物组或者本发明的第二个方面所述的试剂盒中的引物对进行巢式PCR扩增；

步骤3，比较扩增产物大小，并进行测序比对，若检测出现583bp左右的特异性条带则判断为检出槟榔黄化植原体。