[发明专利]一种测定丙酸氟替卡松乳膏中丙酸氟替卡松含量的方法

权利要求书

1.一种测定丙酸氟替卡松乳膏中丙酸氟替卡松含量的方法，其特征在于，通过高效液相色谱分析方法对所述丙酸氟替卡松乳膏进行分析，以便获得色谱图，以及基于所述色谱图，确定所述丙酸氟替卡松乳膏中丙酸氟替卡松的含量，其中，所述高效液相色谱采用以下条件：

色谱柱：Xbridge C18，4.6mm×150mm，3.5μm，

检测器：DAD或UV，

检测波长：240nm，

柱温：50℃，

流动相A：1.2g/L磷酸二氢铵溶液，所述磷酸二氢铵溶液pH值为3.5，

流动相B：乙腈，

流动相C：甲醇，

流速：1.5mL/min，

洗脱梯度：以流动相A、流动相B与流动相C的体积比为14∶40∶46进行等度洗脱，

运行时间：15min。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相A的pH调节剂为磷酸。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述丙酸氟替卡松乳膏是以供试品溶液的形式提供的，其中，所述供试品溶液为丙酸氟替卡松乳膏、内标储备液与乙腈--水溶液的混合溶液，并且基于每毫升供试品溶液，其中丙酸氟替卡松与内标物的浓度均为20μg/mL。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述内标储备液为丙酸倍氯米松的四氢呋喃溶液，其中每1ml溶液中约含0.5mg丙酸倍氯米松。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述乙腈--水溶液是乙腈和水的混合溶液，其中乙腈：水的体积比为5:3。

6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备方法为精密称取丙酸氟替卡松乳膏2g置离心管中，加入内标储备液2ml，涡旋使完全分散，加入乙腈5ml和水3ml，超声10分钟，离心20分钟，取下清液，过滤，弃初滤液2ml，精密量取续滤液2ml，置10ml量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀，即得每1ml中含丙酸氟替卡松与丙酸倍氯米松各约20μg的溶液。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述供试品溶液的配制方法为精密称取丙酸氟替卡松乳膏2g置离心管中，加入内标储备液2ml，涡旋使完全分散，加入乙腈5ml和水3ml，超声10分钟，每隔1分钟手动振荡30s，以4000rpm离心20min，取下清液，用0.22μm疏水性PTFE滤头过滤，弃初滤液2ml，精密量取续滤液2ml，置10ml量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀，即得每1ml中含丙酸氟替卡松与丙酸倍氯米松各约20μg的溶液。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述进样量为20µl。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述基于所述色谱图，所述丙酸氟替卡松含量是通过以下公式确定的：

,

式中：

f：校正因子；

c_对主：丙酸氟替卡松对照品的浓度；

c_对内：丙酸倍氯米松对照品的浓度；

W_样：供试品称样量（g）；

V_样：供试品稀释体积；

A_样主：供试品溶液主成分峰面积；

A_样内：供试品溶液内标物峰面积；

A_对主：对照品溶液主成分平均峰面积；

A_对内：对照品溶液内标物平均峰面积；

规格：以0.5mg/g计。

10.一种测定丙酸氟替卡松乳膏中丙酸氟替卡松含量的方法，其特征在于，包括：

（1）色谱条件

色谱柱：Xbridge C18，4.6mm×150mm，3.5μm，

检测器：DAD或UV，

检测波长：240nm，

柱温：50℃，

流动相A：1.2g/L磷酸二氢铵溶液，所述磷酸二氢铵溶液法人pH值为3.5，

流动相B：乙腈，

流动相C：甲醇，

流速：1.5mL/min

洗脱梯度：以流动相A、流动相B与流动相C的体积比为14∶40∶46进行等度洗脱，

运行时间：15min；

（2）配制稀释剂

以B相、四氢呋喃和水的体积比为5:2:3的混合溶液作为稀释剂；

（3）配制对照品储备液

精密称取丙酸氟替卡松对照品10mg，置50ml容量瓶中,加乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，即得每1ml中约含0.2mg丙酸氟替卡松的对照品储备液；

（4）配制杂质D储备液

精密称取杂质D对照品5mg，置50ml容量瓶中，加甲醇40ml溶解并用水稀释至刻度，摇匀，即得每1ml中约含0.1mg杂质D的杂质D储备液，杂质D结构如下所示：

；

（5）配制内标储备液

精密称取丙酸倍氯米松对照品25mg，置50ml容量瓶中，加四氢呋喃溶解并稀释至刻度，摇匀，即得每1ml中约含0.5mg丙酸倍氯米松的内标储备液；

（6）配制供试品溶液

 精密称取丙酸氟替卡松乳膏2g置离心管中，加入内标储备液2ml，涡旋使完全分散，加入乙腈5ml和水3ml，超声10分钟，离心20分钟，取下清液，过滤，弃初滤液2ml，精密量取续滤液2ml，置10ml量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀，即得每1ml中含丙酸氟替卡松与丙酸倍氯米松各约20μg的溶液；

（7）配制对照品溶液

精密量取对照品储备液5ml与内标储备液2ml，置50ml容量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀，即得每1ml中含丙酸氟替卡松与丙酸倍氯米松均约20μg的对照品溶液；

（8）配制系统适用性溶液

精密量取对照品储备液2.5ml、杂质D储备液与内标储备液各1ml，置25ml容量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀，即得每1ml中含丙酸氟替卡松、丙酸倍氯米松各约20μg与杂质D约4μg的系统适用性溶液；

（9）系统适用性溶液进样

精密量取20µl系统适用性溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图；

（10）供试品溶液进样

分别精密量取20µl供试品溶液与对照品溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图；

（11）计算

,

式中：

f：校正因子；

c_对主：丙酸氟替卡松对照品的浓度；

c_对内：丙酸倍氯米松对照品的浓度；

W_样：供试品称样量（g）；

V_样：供试品稀释体积；

A_样主：供试品溶液主成分峰面积；

A_样内：供试品溶液内标物峰面积；

A_对主：对照品溶液主成分平均峰面积；

A_对内：对照品溶液内标物平均峰面积；

规格：以0.5mg/g计。