[发明专利]一种禾谷镰刀菌孢子液的制备方法

权利要求书

1.一种禾谷镰刀菌孢子液的制备方法，其特征在于，利用秸秆培养基培养禾谷镰刀菌，促进禾谷镰刀菌产生大量孢子。

2.根据权利要求1所述禾谷镰刀菌孢子液的制备方法，其特征在于，所述的秸秆培养基包括小麦秸秆培养基和玉米秸秆培养基中的一种或几种。

3.根据权利要求2所述禾谷镰刀菌孢子液的制备方法，其特征在于，所述的玉米秸秆培养基的制备方法为：将玉米秸秆洗净，烘干，剪成3cm的小段，称取50g于2000mL的烧杯中加入1100mL纯水，煮至液面下降至1000mL，冷却后过滤定容，即制成玉米秸秆煮沸液母液；将母液按比例稀释分装，无菌封口膜封口后121℃湿热灭菌30min，冷却后加入质量浓度为1％的氯霉素，即得玉米秸秆培养基。

4.根据权利要求2所述禾谷镰刀菌孢子液的制备方法，其特征在于，所述的小麦秸秆培养基的制备方法为：将小麦秸秆洗净，烘干，剪成3cm的小段，称取50g于2000mL的烧杯中加入1100mL纯水，煮至液面下降至1000mL，冷却后过滤定容，即制成小麦秸秆煮沸液母液；将母液按比例稀释分装，无菌封口膜封口后121℃湿热灭菌30min，冷却后加入质量浓度为1％的氯霉素，即得小麦秸秆培养基。

5.根据权利要求1-4任一所述禾谷镰刀菌孢子液的制备方法，其特征在于，所述的玉米秸秆培养基或小麦秸秆培养基的质量浓度为1％-5％。

6.根据权利要求1-4任一所述禾谷镰刀菌孢子液的制备方法，其特征在于，具体步骤包括：

1)将禾谷镰刀菌在PDA培养基上，温度26-28℃活化培养3-5天；

2)待菌落长至直径3-5cm时，用无菌打孔器在边缘打孔得到若干直径为3mm的菌饼，利用无菌接种针将菌饼挑取接种到配置好的培养基中，每个培养基中接种2个菌饼；

3)将接种了菌饼的培养基放在摇床上180rpm恒温27℃避光培养7天；

4)将各培养基用四层纱布过滤除去菌丝，12000转/分钟离心5min，弃去上清液，再加入适量无菌水用涡旋仪混匀，即得禾谷镰刀菌孢子液。

7.权利要求1-6任一所述方法制得孢子浓度为36.25×10⁵个/mL的禾谷镰刀菌孢子液。