[发明专利]一种靶向ALK融合蛋白的放射性多肽68Ga-DOTA-PG01及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种靶向ALK融合蛋白的放射性多肽⁶⁸Ga-DOTA-PG01，其特征在于，通过生物偶联技术将环状多肽PG01 N端的氨基与偶联剂DOTA-NHS进行缩合反应，得到多肽偶联物DOTA-PG01；所述多肽偶联物DOTA-PG01中的螯合剂DOTA与⁶⁸Ga螯合，构建靶向ALK融合蛋白的放射性多肽⁶⁸Ga-DOTA-PG01；

所述放射性多肽⁶⁸Ga-DOTA-PG01的结构式如下所示：

所述靶向ALK融合蛋白的放射性多肽⁶⁸Ga-DOTA-PG01的氨基酸序列为：

Phe-cyclo(Cys-D-Trp-Thr-Lys-Tyr-Cys)-Thr，

其中，环状结构由Cys-D-Trp-Thr-Lys-Tyr-Cys通过两个半胱氨酸之间形成二硫键成环。

2.根据权利要求1所述的靶向ALK融合蛋白的放射性多肽⁶⁸Ga-DOTA-PG01，其特征在于，所述DOTA-PG01的结构式如下所示：

3.根据权利要求1-2任一项所述的靶向ALK融合蛋白的放射性多肽⁶⁸Ga-DOTA-PG01的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)采用固相合成法，合成DOTA-Phe-Cys-D-Trp-Thr-Lys-Tyr-Cys-Thr多肽序列；

(2)将步骤(1)制备得到的多肽序列进行环化及纯化，得到多肽偶联物DOTA-PG01；其中，环状结构通过两个半胱氨酸的巯基缩合形成二硫键；

(3)对多肽偶联物DOTA-PG01进行⁶⁸Ga标记，得到靶向ALK融合蛋白的放射性多肽⁶⁸Ga-DOTA-PG01。

4.根据权利要求3所述的靶向ALK融合蛋白的放射性多肽⁶⁸Ga-DOTA-PG01的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)的执行过程为：

以Rink amide-MBHA resin树脂为起始树脂、Fmoc-Thr为原料，采用DIPEA/HBTU/HOBT缩合体系固相法合成DOTA-Phe-Cys-D-Trp-Thr-Lys-Tyr-Cy s-Thr多肽树脂，再用TFA/TIS/PhOH/Thioanisole/H₂O裂解液从该多肽树脂上裂解DOTA-Phe-Cys-D-Trp-Thr-Lys-Tyr-Cys-Thr多肽序列；

上述过程的具体流程包括：

用哌啶DMF溶液脱去Rink amide-MBHA resin树脂上的氨基保护基，洗涤所述树脂，用含有DIPEA/乙酸酐的DCM溶液封闭所述树脂上未反应的位点；

除去溶剂、再洗涤所述树脂后，连接Fmoc-Thr，获得Fmoc-Thr-MBHA树脂序列；

脱去Fmoc-Thr-MBHA树脂序列上的Fmoc保护基团，按照从羧基端到氨基端的顺序对氨基酸序列Phe-Cys-D-Trp-Thr-Lys-Tyr-Cys-Thr依次重复脱保护并在DIPEA/HBTU/HOBT缩合体系中进行缩合反应，直至多肽序列全部偶联到Fmoc-Thr-MBHA树脂序列上，获得Fmoc-Phe-Cys-D-Trp-Thr-Lys-Tyr-Cys-Thr多肽树脂；

然后脱去Fmoc-Phe-Cys-D-Trp-Thr-Lys-Tyr-Cys-Thr多肽树脂上的Fmoc保护基团，连接偶联剂DOTA-NHS，获得DOTA-Phe-Cys-D-Trp-Thr-Lys-Tyr-Cys-Thr多肽树脂；

最后采用TFA/TIS/PhOH/Thioanisole/H₂O裂解液从树脂上裂解多肽，得到DOTA-Phe-Cys-D-Trp-Thr-Lys-Tyr-Cys-Thr多肽序列。