[发明专利]检测或辅助检测动物源性饲料原料中昆虫源的引物组合物及其应用

说明书

本发明公开了检测或辅助检测动物源性饲料原料中昆虫源的引物组合物、生物材料及其应用。本申请要解决的解决的技术问题是如何在动物源饲料中检测昆虫源。本申请公开了引物组合物，所述引物组合物包括引物对A、引物对B和引物对C的一种或多种；所述引物对A特异性检测黄粉虫，所述引物对B特异性检测黑水虻，所述引物对C特异性检测柞蚕。通过使用引物对A、引物对B和引物对C的一种或多种对动物源饲料进行体外热循扩增，根据扩增结果可以准确判断动物源饲料中是否含有黄粉虫、黑水虻或柞蚕。

技术领域

本发明涉及分子生物技术领域中检测或辅助检测动物源性饲料原料中昆虫源的引物组合物、生物材料及其应用。

背景技术

畜牧业和水产养殖业的快速发展使得我国饲料资源短缺，尤其是蛋白质饲料资源的短缺制约着我国畜牧业和水产养殖业的生产。其中动物源性饲料原料是饲料蛋白中的主要来源，包括鱼粉、肉粉、血粉、血浆蛋白粉、羽毛粉、肉骨粉、皮革粉和昆虫原料等。昆虫原料原料因其蛋白和脂肪含量高，生长速度快，养殖效率高等优势，近些年被作为优质蛋白源被广泛应用于饲料产业，主要包括黄粉虫、黑水虻和柞蚕。黄粉虫(Tenebrio molitor)俗名面包虫，为鞘翅目拟步甲科粉甲属的昆虫。黄粉虫富含蛋白质、维生素、矿物质等营养成分，具有易于消化吸收的特点，是优良的畜禽的饲料添加剂，可以提高产品的产量以及质量。黑水虻(Hermetia illucens L.)，腐生性的水虻科昆虫，能够取食禽畜粪便和生活垃圾，生产高价值的动物蛋白饲料，因其繁殖迅速，生物量大，食性广泛、吸收转化率高，容易管理、饲养成本低，动物适口性好等特点，从而进行资源化利用，其幼虫被称为“凤凰虫”，成为与蝇蛆、黄粉虫、大麦虫等齐名的资源昆虫，在全世界范围内得到推广。柞蚕(Antheraeapernyi)是鳞翅目大蚕蛾科柞蚕属的一种动物。柞蚕分布广泛，繁殖率高，既有野生又有饲养，资源极为丰富。柞蚕体内不仅积累了大量的营养物质，而且含有极其丰富的生理活性物质，在饲料产业的前景十分可观。为了更好服务于饲料产业，区分常见的昆虫原料的种类显得尤为关键。

昆虫原料在形态上较为相似，不具备明显的特征，使用常规的感官鉴定、化学检测、光镜检测在昆虫原料的检测中效果不佳。

基因检测技术是基于遗传物质DNA进行鉴定，能够从分子水平对不同物种进行区分，且具有需样品量小，更加准确、灵敏等特点。该方法在鱼粉、肉粉等方面有相关的报道，但针对昆虫原料的检测鲜有报道，亟需弥补昆虫原料基因检测的空缺。

发明内容

基于上述内容，本申请要解决的技术问题是如何提供一种鉴定检测或辅助检测动物源性饲料原料中昆虫源的引物组合物，尤其是黄粉虫、黑水虻和柞蚕。

为了解决上述问题，本申提供了鉴定或辅助鉴定动物源饲料原料中昆虫原料成分来源的引物组合物。

所述引物组合物包括特异于黄粉虫的引物对A、特异于黑水虻的引物对B和特异于柞蚕的引物对C这三种引物对中的三种、两种或一种；

所述引物对A由A-F和A-R组成，所述A-F是核苷酸序列为SEQ ID No.1的单链DNA分子，A-R是核苷酸序列为SEQ ID No.2的单链DNA分子；

所述引物对B由B-F和B-R组成，所述B-F是核苷酸序列为SEQ ID No.3的单链DNA分子，B-R是核苷酸序列为SEQ ID No.4的单链DNA分子；

所述引物对C由C-F和C-R组成，所述C-F是核苷酸序列为SEQ ID No.5的单链DNA分子，C-R是核苷酸序列为SEQ ID No.6的单链DNA分子。

为了解决上述问题，本申还提供了鉴定或辅助鉴定动物源饲料原料中昆虫原料成分来源的生物材料。

所述生物材料包括下述任一种：

D1)含有上述引物组合物的体外核酸扩增试剂；

D2)含有上述引物组合物或D1)所述体外核酸扩增试剂的试剂盒；