[发明专利]EB病毒早期抗原IgA抗体检测试剂盒

说明书

本发明涉及免疫检测技术领域，具体涉及EB病毒早期抗原IgA抗体检测试剂盒。本发明提供了一种EB病毒早期抗原IgA抗体检测试剂盒，其包括固相载体混悬液、酶结合物溶液以及样品稀释剂，所述固相载体混悬液中，固相载体表面包被有EB病毒早期抗原。所述样品稀释剂中包括表面活性剂，所述EB病毒早期抗原采用非离子表面活性剂对其进行活化处理。与现有EB病毒检测试剂盒相比，本发明提供的检测试剂盒稳定性好、灵敏度高、背景信号弱且特异性强，适宜推广使用。

技术领域

本发明涉及免疫检测技术领域，具体涉及EB病毒早期抗原IgA抗体检测试剂盒。

背景技术

EB病毒(Epstein Barr virus,EBV),又称人类疱疹病毒，它只能在B淋巴细胞中增殖,其感染与多种疾病有关。根据感染后是否产生有感染性的病毒子代,可分为增生性感染和非增生性感染:与增殖性感染相关的抗原有早期抗原、膜抗原和衣壳抗原,已确定的非增殖性感染抗原有核抗原和潜伏感染蛋白.研究EBV的抗原及抗体,对揭示EBV与鼻咽癌的关系以及鼻咽癌的早期诊断均有重要意义。

目前EB病毒感染检测方法包括病毒培养、免疫学检测、EBV DNA载量检测等。由于EBV存活需要宿主细胞，故病毒体外培养有一定的局限性，如取材一般需要急性期患者的唾液或淋巴细胞,培养的时间较长，阳性率低，一般在临床检测中较少应用。EBV以环状DNA形式存在于淋巴细胞胞浆中，90％的人为潜伏性感染，只有活动期的EBV可破坏淋巴细胞，进入血液循环,绝大多数的血浆游离DNA片段大小为82～181kb，因此可采用PCR检测血浆中游离DNA的含量。但是在早期诊断中灵敏度低，特异性较差。

目前EBV检测主要采用免疫学检测方法，通常用酶免疫法或免疫荧光技术检测不同感染阶段产生的抗体。目前的EB病毒检测中，由于样本检测时固相抗原与样本中干扰因子结合产生的非特异性吸附，所导致的背景信号杂乱、免疫诊断结果的假阳性检出率高且灵敏度低等问题尚待解决。

发明内容

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供EB病毒早期抗原IgA抗体检测试剂盒，本发明提供了稳定性好、灵敏度高且特异性强的EB病毒早期抗原IgA抗体检测试剂盒。

本发明提供了一种EB病毒早期抗原IgA抗体检测的试剂或试剂盒，包括：

固相载体混悬液、酶结合物溶液以及样品稀释剂；

所述固相载体混悬液中，固相载体表面包被有EB病毒早期抗原；

所述酶结合物溶液中，酶结合物为酶标记的抗人IgA抗体；

所述样品稀释剂包括小牛血清、蛋白稳定剂、P300和表面活性剂。

本发明所述样品稀释剂中，添加表面活性剂从而提高检测的灵敏性、稳定性和特异性。研究表明，表面活性剂的选择对试剂的检测效果产生影响。一些实施例中，样品稀释剂中的表面活性剂的浓度为0.08vol％～5vol％，其种类选自Trixton-100、聚乙烯亚胺、十六烷基三甲基溴化铵和聚二烯丙基二甲基氯化铵中的至少一种。进一步研究表明，与其他表明活性剂及蛋白稳定剂相比，所述样品稀释液中添加Trixton-100，更有利于与其他试剂配合，获得更优秀的检测效果。

本发明所述样品稀释剂中，蛋白稳定剂、P300和小牛血清能够辅助表面活性剂，使样本的靶标结合位点更好的暴露，获得更准确、灵敏的检测效果。一些实施例中，所述蛋白稳定剂为多羟基糖类，所述多羟基糖类选自蔗糖或海藻糖中的至少一种，具体为蔗糖。

一些具体实施例中，所述样品稀释剂中包括水、Trixton-100、小牛血清和P300。该样品稀释剂与EB病毒早期抗原及抗人IgA抗体的兼容性更高，抗干扰能力更强，从而获得更准确、更灵敏的技术效果。